大连市银杏叶斑病病原菌鉴定.pdfVIP

第 37卷第 3期 辽宁师范大学学报 (自然科学版) Vo1．37 NO．3 2O14年 9月 JournalofLiaoningNormalUniversity (NaturalScienceEdition) Sep． 2014 文章编号 ：1000—1735(2014)03—0396—06 doi：10．11679／lsxblk2014030396 大连市银杏叶斑病病原茵鉴定 姜 华 ， 杨 策 ， 石 鑫 (1．辽宁师范大学 生命科学学院，辽宁 大连 116089；2．大连六环景观建筑设计院有限公司，辽宁 大连 116007) 摘 要：银杏 (GinkgobilobaL．)是常见的城市 园林观赏绿化树种，并具有极高的材用、 食用和药用价值．近年来，大连市银杏树发生了一种不明病 因且较为严重的叶斑病，查 明 病因、为病害防治提供理论依据迫在眉睫．从病害发生严重区域采集叶斑病病叶样本 ，采 用感病叶片单斑分离法 ，对分离菌株进行致病性测定、形态学鉴定及分子生物学鉴定等 ， 对大连市银杏树发生的叶斑病进行 了病原菌鉴定．结果表 明，大连银杏 叶斑病致病菌有 2种 ，分别为链格孢属细极链格孢 (Alternariatenuissima)和链格孢(Alternariaalterna— ta)．迄今为止，细极链格孢 (Alternariatenuissima)侵染银杏导致其发生 叶斑病鲜有 报道． 关键词 ：银杏 ；叶斑病 ；链格孢 中图分类号 ：$435．675 文献标志码 ：A 银杏 (GinkgobilobaL．)俗称 白果 ，公孙树 ，是现存种子植物中最古老的孑遗植物 ，是我 国特有珍 贵的绿化 、观赏和用材树种，属二级保护植物叫．它具有极高的材用、食用、药用和观赏价值，是城市 中 常见的行道树 ，也是大连园林主栽树种 ，在城市绿化景观建设 中具有不可替代的作用．近年来 ，大连市 区银杏叶片发生了较为严重的叶斑病，查明病因为防治此病提供理论依据成为当务之急，笔者对此进 行了叶斑病病原菌的分离鉴定． 1 材料与方法 1．1 试剂与培养基 DNAMarker(DL2000)、dNTP、TaqDNA聚合酶、buffer等均购 自大连 TaKaRa公司；引物合成、 DNA测序由生工生物工程 (上海)股份有限公司完成 ；PDA培养基等所需试剂均为国产分析纯． 1．2 病害调查及症状观察 在大连市银杏发病 区随机选取5点 ，每点4株 ，每株选东西南北树枝分上中下 3部位，每部位选 l0 片叶．从发病初期每隔 10d观察 1次 ，统计病叶率 、病株率 、病情指数[2]．病情分级标准见表 1． 1．3 病原茵分离纯化与形态学鉴定 采用单斑分离和菌丝尖端分离纯化法 引．取感病叶片在病健交界处剪取典型病斑块 ，表面消毒后 转至 PDA培养基上 28℃恒温培养 ，3～4d后观察 菌落生长状况，计算菌株分离率．菌株纯化后，依据其形态特征鉴定到种 ． 收稿 日期 ：2014—07—25 基金项 目：辽宁省高等学校科学技术研究项 目(2008S135) 作者简介 ：姜华 (1958一)，女，黑龙江富裕人 ，辽宁师范大学教授 ，博士．E—mail：jianghua1225@163．Corn 第 3期 姜 华等 ： 大连市银杏叶斑病痛原茵鉴定 4O1 E73 SAITOUN．NEIM．Theneighbor-joiningmethod：anewmethodforreconstructingphylogenetietreesE]]．MolecularBiologyand Evolution，1987，4：406—425． [83 宋益民，高宇人，顾春燕，等．银杏叶部病害诊断及发生规律初步研究[J]．落叶果树，2000(6)：19—20． [93 江德安．戴余军．银杏叶部病害的发生与防治研究[J]．安徽农业科学，2008，36(15)：6370—6371，6345 [1O3 陈丽完．四川银杏叶部真菌病害调查与银杏轮班病的研究[D]．成都：四川农业大学，ZOlO． [11]