实时荧光定量 PCR 检测 HBV DNA 的线性范围与最低检出限的验证.pdfVIP

国际检验医学杂志2014年 9月第35卷第 17期 IntJLabMed，September2014，Vo1．35，No．17 · 检验技术与方法 · 实时荧光定量 PCR检测 HBVDNA 的线性范围与最低检出限的验证 张运洪 ，秦维超 ，何 玲 ，黄建军 (重庆市江津区中心医院检验科，重庆 402260) 摘 要 ：目的 试用实时荧光定量 PCR定量检测 乙型肝炎病毒核酸 (HBVDNA)，求 出其线性范围与最低检 出限，从而对本 实验室检测 HBVDNA的主要性能进行验证 。方法 参照相关的文件 ，通过 系列稀释高浓度标本得到超过厂家 申明线性范围的 系列浓度标本 ，进行线性范围的验证 ；通过系列稀释低浓度标本得到超过厂家 申明最低检 出限的系列浓度标本 ，进行最低检 出限 的验证 。结果 HBV DNA检测的线性 范围为 8．58×10。～8．41×10 IU／mI，最低检 出限为 4．O7×10。IU／mI。结论 实时荧 光定量 PCR检测 HBV DNA的线性 范围与最低检 出限达到预期要求 ，检 测方法和验证 方案 简便 、可行 。 关键词 ：实时荧光定量聚合酶链反应 ； 乙型肝炎病毒核酸 ； 线性范围； 最低检 出限 DOI：10．3969／j．issn．1673—413O．2O14．17．O41 文献标识码 ：A 文章编号：1673～4130(2014)17-2362—03 Verification ofthelinearrangeandtheminimum detectionlimitinreal—timefluorescencequantitativePCR forHBV DNA ZhangYunhong，QinWeichao，HPLing，HuangJianjun (DepartmentofClinicalLaboratory，JiangjinCenterHospital，Chongqing402260，China) Abstract：Objective Usereal—timefluorescencequantitativepolymerasechainreaction(PCR)todetermineHBV DNA，then calculatethelinearrangeandtheminimum detectionlimit，whicharethemainperformanceindicatorsinthelaboratoryverification． Methods Accordingto therelateddocuments．by serialdilutionofhighconcentrationsamples，samplesofserialconcentrations wereobtainedwhichwereoutofthelinearrangementionedintheinstructions，thenverifidthenew linearrange．Byserialdilution oflow concentration，sampleswereobtained，theconcentrationsofwhichwerelowerthantheminimum detectionlimitofprovideby themanufacturer．thenthenew minimum detection1imitwasverified．Results The1inearrangeofHBV DNA detectionwas8．58× 1O～8．4l×1O IU／mL，andtheminimum detectionlimitofHBVDNAdetectionwas4．07×10。IU／mIConclusion Thelinear rangeandtheminimum detectionlimitofReal—timefluorescencequantitativePCR assessedreachestheexpectedrequirement，and themethodandvalidationschemearesimpleandfeasible． Keywords：real-ti