猪胚胎发育相关基因ABIN-1的cDNA克隆与表达.pdfVIP

第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 猪胚胎发育相关基因ABIN．1的cDNA克隆及表达 欧阳宏佳1，方梅霞L2，周晓宁1，聂庆华1，张细权1 1。华南农业大学动物科学学院动物遗传育种与繁殖系，广州510642；2。暨南大学医学院实验动物管理中心，广州510632 关键词：猪；ABIN．1基因；克隆；表达 引言 泛素化受体ABIN．1(A20andinhibitorofNF．kB)，具有抑制NF．kB的功能。最新研究的发现， binding ABIN．1剔除的小鼠在胚胎发育过程中会出现以下症状，肝脏自我坏死，贫血和发育不全，并因此而死亡。 高度敏感，导致细胞进入凋亡程序。迄今为止，有关ABIN．1基因的研究主要集中在人和小鼠上，有关猪ERKl／2 基因的研究未见任何报道，本文对猪ABIN一1基因开展研究，证实该基因的存在，并初步揭示该基因的结构、 表达规律，为后续的研究奠定基础。 材料与方法 列分析。利用Real．timePCR技术，研究该基因在猪各组织中mRNA表达规律。 结果 2248 PCR克隆测序结果表明，获得猪ABIN．1基因cDNA bp，开放阅读框(ORF) bp，其中5’UTR区83 区域1902 264 bp，3UTRbp。全基因共编码633个蛋白氨基酸，与人和小鼠的同源性达86．0％和78．9％。 实验中还发现另一转录本(AB烈一1S)，该转录本于“40到+520处81 bp缺失，即第120氨基酸到第146氨基 实时荧光定量PCR分析表明，该基因表达量较高的是脾脏，在消化器官(大肠、小肠、胃)、背肌、脑部组 织(大脑、小脑、下丘脑)、淋巴组织、肺、肝、心、胸腺、卵巢等组织也有表达，在子宫、输卵管，脂肪组 织(背膘、腹脂)等组织中不表达。 讨论与结论 的cDNA序列，并对该基因的基因结构、编码蛋白氨基酸序列、组织表达规律进行了分析。从所得结果看， 基因具有类似的生物学功能。从基因的表达规律看，人的ABIN一1基因在脾脏中的表达量也较高，在卵巢、 肺、肾、心、肌肉、肝脏等多个组织中也有表达，这些与猪的都较为一致，可以初步预测猪ABIN一1基因将 是影响猪胚胎生长的重要候选基因。但该基因在人和鼠的子宫和输卵管中也有表达，而猪是基本不表达。有 报道表明在黑猩猩中有3种异构体，猕猴中有2种异构体，人有12种异构体。而在本研究中仅发现ABIN．1 基因的另一个异构体ABIN一1S，在人和鼠等其他物种中均未发现类似的编码蛋白缺少27个氨基酸的转录体。 一步深入研究猪ABIN．1基因提供了重要参考信息。 致谢 港关键领域重点突破项目(2008A02)资助。 一338—