海绵共附生微生物与其活性代谢产物.pdfVIP

元素分析及紫外扫描显示在260～280姗出现吸收峰，表明提取得到的多糖中可能含有蛋白质或核酸。 摩尔比为5．13：2．15：1．99：l：4．35。 参考文献(略) 海绵共附生微生物及其活性代谢产物 潘志强，黄惠琴，鲍时翔· (中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101) 海绵是海洋微生物最大的宿主，现在已被作为海洋活性化合物的重要来源【11进行研究。所有的海绵 等的研究表明许多来自海绵的活性物也是由其共附生的微生物所产生妇1。但也有一些研究认为这些代谢 物似乎可以由海绵细胞本身所产生。本文就目前海绵共附生微生物及其代谢物的研究，以及在研究海绵 共附生微生物及其代谢产物时所采用的方法作一综述。 1．海绵共附生微生物 1．1海绵共附生微生物定义 目前，海洋研究工作者认为在以海绵为宿主所发现的全部微生物都被称作海绵共附生微生物，包括 生活在海绵体表和中质层内的和永久性生活在海绵细胞内的微生物。根据UteHentschel等人对采自不 同海域的海绵Aplysinaaerophoba， 存在着相似的微生物种群啦!。 1．2海绵共附生微生物多样性 海绵为什么会有如此多的共附生微生物呢?最明显的一个解释可能就是与其共附生的微生物能够作 为宿主的食物来源，提供给宿主碳水化合物和含氮化合物或其它海绵生理活动所需要的物质。例如海洋 中许多光合细菌能通过自身的光合作用不断为象海绵这样的低等生物提供能量和营养，Cheshire等人推 测，海绵Phyllospongio 是海绵共附生微生物(自养和异养)能产生一系列起到化学防御作用的化合物象抗生素、抗真菌化合物 以及除污化合物等。Miki等于1996年已从海绵中分离出了几种具有较强降污能力的化合物哺1。因为象 海绵这样的海洋低等生物一般缺少免疫机制，它们就往往借助于与其共附生微生物的化学防御代谢物以 及共附生微生物与外界环境的微生物的拮抗作用来保护自身。正是由于海绵体内存在大量的微生物，才 使它成为了从海洋中寻找有生物活性物质的重要来源。 自从上世纪60年代以来，对海绵及其共附生微生的研究方面已开展了许多研究工作，也是当前众多 ·110· 有时甚至超过其体积的一半以上。但是，对于这些微生物的分离却存在很大的难度，这是因为它们生活 在海绵这样一个特殊的生境中，所以，仅是运用当前的分离技术对其进行分离培养，则是十分不易的。 根据不同的研究均表明：目前海绵中共附生微生物只有l％一lO％是可以培养成功的。从近阶段由海绵所 分离培养成功的共附生微生物的种群来看，主要有细菌、放线菌、真菌、还有海洋古菌∽1。 1．3海绵共附生微生物多样性的研究方法 随着现代分子生物技术日益发展，结合经典的组织学方法与显微镜形态学方法，已能很容易地对海 rRNA基因序列分析己被用于海 绵共附生微生物进行了鉴定。目前，荧光原位杂交技术(FISH)与16s 绵共附生微生物的研究之中。rRNA基因序列作为生物系统发育的指标较为合适，其主要依据是：它们 为细胞所共有，其功能同源且进化古老，既含有保守序列又含可变序列，它们的序列变化与进化距离相 适，其中16SrRNA分子大小适中，不仅包含有丰富的基因保守区域，而且进化上也相对较保守，俗有 “生物钟”之美称，所以已成为进行系统分类研究最为理想的对象。以荧光标记的16SrRNA片段为探 针的荧光原位杂交技术(FISH)，是一种不需进行PCR反应就可确定微生物群落组成的方法，由于发 荧光寡聚核苷酸探针被应用于荧光原位杂交技术中，因而，可以根据发光位置鉴定出目标细菌的空间分 布。根据16srRNA基因序列的分析和荧光探针进行原位杂交，还可以对不同种群的微生物在海绵中的分 odorabil中的细菌具有 布进行定位及半定量的分析。Webster等利用该方法研究发现在海绵Rhopaloeides 丰富的系统多样性，其中30％属于放线菌，41％属于变形纲的1，亚纲，还发现了两个亚群的新古菌，其中 rRNA基因序 列分析的结果，并发现该海绵中