建立心梗心衰大鼠心气虚、心阳虚病证模型与其对中医证的再认识.pdfVIP

建立心梗心衰大鼠心气虚、心阳虚病证模型及其对中医证的再认识 209 建立心梗心衰大鼠心气虚、心阳虚病证模型 及其对中医证的再认识 王硕仁 王振涛 李敏 赵明镜 崔巍 朱陵群 吕希莹 1007 北京中医药大学气血研究实验室 中医内科学实验室(北京 00) 司瑚殇，，!，l f ＼中医证候动物模型的制作研究已有近40年的历史，其中肾气虚、脾气虚证模型是研究最多／带0作 模型数量也最多的证型。据现在的不完全统计，心气虚证动物模型约有5种制作方法，多应用于基础 研究，并与其他证的模型一样，有相当一部分模型缺少用科学的评价体系评价。(我曲结合全国心气虚 证临床和基础研究的成果，开展建立心气虚、心阳虚病证动物模型及其评价体系的研究。j ≥|～l√ 材料与方法 凹：／ 1．材料 动物正常雄性Wistar大鼠，体重250--+10克。中国医学科学院实验动物中心提供。 厂生产)、RBP一1B型鼠尾动脉血压计(中日友好医院临床医学研究所制造)。LeicaRM2135石蜡切片机 sofware (德国)：BX-60荧光／透射显微镜(日本Olympus公司)；SpotIIV3．0显微图象分析系统(美 国DiagnosticInstruments公司)；Biofuge International IRT3520红外线体温计(德国)。 Reagents公司)。BRAUN 2．方法 2．I动物模型制作大鼠经1％戊巴比妥钠50mg／kg腹腔麻醉，背位固定。气管插管、接呼吸机， 分离肌层，开胸．以开胸器扩大手术视野，剪开心包。造模组大鼠在动脉圆锥与左心耳之间下约lmm 处结扎左冠状动脉。当心电图I导联显示ST段显著抬高后，重置心脏于胸腔，并立即分层缝合胸壁。 待观察动物心律、呼吸平稳后，停止人工呼吸。连续3天注射青霉素预防感染。假手术组大鼠手术过 程同上，但不结扎左冠状动脉。 2．2动物模型的疾病诊断 动物模型。心衰动物模型继续常规喂养1个月。于手术后第9周开始以L-NNA对心衰大鼠灌胃， lOOmg／kg／d，一个月，以造成心衰的发展。其心功能再经阻抗法测定。 2．3动物模型的中医证候诊断 动物于手术后连续观察中医证候3个月，根据虚证和血瘀证辨证标准诊断，并进行药物验证性治 疗诊断。 2．3．1中医虚证辨证标准采用中国中西医结合会虚证和老年病专业委员会1986年5月修订的虚 证辨证标准．该标准中规定的心气虚证诊断必备条件：心悸或胸闷、神疲乏力分别以心率、呼吸、力 竭性游泳时间测定表示；心功能障碍等参考标准以血流动力学指标表示：有关心阳虚证的诊断条件： 全身或局部畏寒或肢冷、夜尿频多分别以大鼠体温和尿量实验表示：另外还观察大鼠的一般状况(活 210 第六次全国中西医结合心血管病学术会议论丈汇编 动量、毛发、精神状况)、体重增加指数、饲料消耗指数和前述心气虚证候指标的变化。 心率测定方法大鼠经1％戊巴比妥钠25mg／kg腹腔注射、行浅麻醉，背位固定。经心电图测定5 个R～R间期，其均值除以60得心率。 呼吸测定方法术后第3天起，每3天观察一次呼吸，共观察lO个点。每次观察都于上午8～10 时(动物熟睡时)，轻柔抓起大鼠，并使其胸腹向上。一人秒表计时、一人数呼吸20秒。结果乘3得 到呼吸频率。 力竭性游泳时间测定术后进行此项实验。游泳池水深35cm，池壁光滑，水池面积0．8m2，水温 31±1℃。大鼠游泳过程中，头下沉10秒定为力竭标志。造模组、假手术组大鼠各随机以7只动物参 加实验。 血流动力学实验大鼠经