秦岭霉素产生菌的分类地位的研究.pdfVIP

中国化工学会农药专业委员会第十二届年会论文集 秦岭霉素产生菌的分类地位研究 龙建友姬志勤昊文君 (西北农林科技大学农药研究所陕西杨凌712100) 摘要：从陕西秦岭山区土壤中分离得到一株链霉菌No．24菌株，其代谢产物对17种农业常见病 生理生化特征、细胞壁化学成分等方面均不同于模式菌株。因此，建议该菌株为链霉菌属的一个 新种，即秦岭链霉菌(Streptomycesqinlingensissp-noⅥ)。 关键词：秦岭霉素，秦岭链霉菌，分类地位， 16SrDNA序列 目前生物农药的使用各受人们关注，特别是那些具有广谱抗真菌和细菌病害的生物农药更受 人们青睐。因此，寻找新菌株，研究新的具广谱抗真菌和细菌病害的生物农药是十分重要和必要 的。 No．24菌株是从陕西秦岭山区土壤中分离的一株链霉菌，其活性代谢产物为13一内酰胺类新型 抗生素。由于此类抗生素大部分都是亩真菌的次级代谢产物所产生的，放线菌尤其是链霉菌屑能 产生这类抗生素实属罕见。故采用16SrDNA序列分析和传统菌株鉴定相结合的方法对该菌株进行 了分类鉴定。 1材料与方法 1．1菌株 No．24菌株：自陕西秦岭山区土壤中分离。 1．2菌株培养及发酵 1．2．1培养 No．24菌株固体培养采用高氏合成一号培养基，液体培养采用小米培养液。 1．2．2发酵 X 108+／rnl 用无菌水将No．24菌株斜面的孢子洗刷下来。并制成孢子悬浮液，使其浓度为1 发酵120h。 1．3形态特征观察 于高氏合成一号培养基上30(2插片培养4d，取出插片用光学显微镜观察其气生菌丝、基内菌 丝、孢子及孢子丝的特征【310 ·37· 中国化工学会农药专业委员会第十二届年会论文集 1．4培养特征观察 将No．24菌株在高氏台成～号、甘氨酸天门冬素、PDA、酵母膏、察氏、淀粉、燕麦片、克 氏一号、甘油天门冬素9种培养基上观察菌株气生菌丝、基内菌丝的颜色，以及可溶性色素的产 生14】。 1．5生理生化特征的观察 参照《放线菌的分类和鉴定》对No．24菌株进行各项生理生化指标试验n 1．6细胞壁化学成分分析 采用TLC对菌株进行全细胞水解液DAP(--氨基庚二酸)，氨基酸类型及糖型分析‘6’7l。 1．716SrDNA序列分析 从新鲜的菌株斜面中挑取少量菌落，采用裂解法提取菌株的总DNA，模板采用放线菌的通用 数据库中的相关种、属的序列进行比较，以确定该菌株的分类地位嘲。 2结果与分析 2．1形态特征观察结果 秦岭链霉菌在高氏～号合成培养基上30(2培养4d后，取出插片在光学显微镜下观察发现： 气生和基质菌丝发达，基丝不形成横隔，也不断裂，气生菌丝形成长孢子链、呈螺旋型，孢子表 面光滑。 图1No．24菌株气生菌丝 图2No．24菌株孢子链 Aerial ofstrainNo．24 ofstrainNo．24 Fig．1 mycelium Fig．2sporothrix 图3No．24菌株孢子 图4S．maritimus(AY247716)孢子 ofstrainNo．24 ofS．maritimus(AY247716) morphology Fig．4spore Fig．3spore 2．2菌株的培养特征 ·38· 中国化工学会农药专业委员会第十二届年会论文集 No．24菌株的培养特征见表I。 一 塞! !!：垡蔓鳖垄!登堕茎茎圭塑撞鲞塑堑 培养基 气生菌丝体