增殖诱导配体基因在实体瘤辅助诊断与治疗的应用研究.pdfVIP

中的核酶仍可将其降解；(4)肿瘤细胞是否拥有内在的RNAi现象，从而对外源性导入的siRNA产生抵抗。 简单地说RNAi用于临床肿瘤治疗尚需解决两个问题，首先是如何把有效的干扰RNA带到肿瘤细胞内， 并对特异性靶基因产生特异性抑制；其次是如何避免RNAi带来的副作用。 增殖诱导配体基因在实体瘤辅助诊断及治疗的应用研究 丁伟峰王惠民王峰王敬春孙宝兰张冬雷施健鞠少卿王跃国 南通大学附属医院检验医学中心南通市226001 自增殖诱导配体(APRIL)基因发现以来，由于其促肿瘤增殖效应，受到研究人员广泛关注，然而目前 很多研究都聚焦于多发性骨髓瘤、霍奇金氏病等血液性疾病中APRIL及其受体的表达定位和功能等，而 APRIL与实体瘤的研究甚少。2004年至今，我们课题组一直致力于该基因在实体瘤中的基础与应用研究， 现将本课题组的研究成果作一梳理，以期为肺癌、胰腺癌和肠癌等实体瘤的辅助诊断及基因治疗奠定一定 的理论基础。 一、APRIL基因的发现 sequence necrosis mg)数据库时，发现了一种新的n司F-a相关配体，因其与TAI，I，．1细mour leucocyte-expressedfigand一1)lipBLyS(B-lymphocyte 有促肿瘤细胞增殖作用，故又命名为增殖诱导配体(a proliferation．inducingligand，APRIL)。 二、APRIL的结构与生物学特性 1．基因定位与分子结构 转录本异构体(剪切变异体)，分别命名为APRILa(NM 单链糖蛋白，全长约250个氨基酸残基，无信号肽序列，属II型跨膜蛋白，其中29-一49氨基酸为疏水的 链中的第一条链上。 2．生物学功能 U937、Raji和Jurkat的增殖，并存在明显的剂量反应关系，而且在低血清培养条件下，这种作用更明显； 同时，我们构建了APRIL编码区的真核表达载体，经脂质体转染肿瘤细胞株后，同样发现APRIL能促进 细胞增殖，说明APRIL基因与调节肿瘤生长关系密切。 三、APRⅡ，的组织分布 研究发现，APRIL在多种肿瘤特别是消化道肿瘤(包括结直肠、十二指肠、胃)组织及细胞株中高 例)的肿瘤组织相对于远端 136 图1 APRIL基固(A)与18SRNA田)的荧光定量PCR法标准曲线 与10例小细胞肺癌(SCLC)OPAPRIL蛋白的表达阳性率分别为87 与蛋白水平发现，癌组织较远端正常组织高表达APRIL。 正常肺泡上皮组织。 图2免疫组化sP法检测肺癌组织中APRIL蛋白表达(SPx200) 四、APRIL辅助诊断恶性实体肿瘤的探索 既然APP,／L在多种实体肿瘤组织均高表达，那么其是否有可能成为实伴肿瘤的辅助诊断标志物呢?我 者、忘性肺部疾病忠者及健康人群痰液标本APRILmRNA水平分别为0 004329044(图3A)，换算为95％可信区问(圈3B)，则阳性率分别为817％(58／71)、32％(2／62)和 1 水平与患者性别、年龄、吸烟史、TNM分期及淋巴结转移无关，上述结果提示APRIL很有希望作为非小 细胞肺癌的诊断标志物。 健康对照组(来公开数据)，提示APR／L很有可能成为结直肠癌尤其是肠腺癌的血精学诊断标志物。 琏_；磊 ■■ l敲减APRIL基因治疗胰腺癌 中，APRILsiRNA能显著抑制人胰腺癌细胞株CFPAC-1的增殖：在体实验中，APRILsiP．NA慢病毒载体 感染的CFPACoi细胞接种BALBIe裸鼠，胰腺癌瘤体的生长速度与体积明显受到抑制；APRILsiRNA慢 病毒载体瘤块内直接注射BALB／c胰腺癌裸鼠移植模型，可显著抑制胰腺癌移植瘤体积与生长速度(图6)。 这些结果表明，APRIL基因很有可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。 ^P阻_嘲_-_带均_-_畔讪蝌怖州～嘞p嘲…懒耐 脚“1“-||lI湖蝴酾■-—|}嗍哟醚煳■■国■--■ I-5分别为未转染组、阴性对照组