生物马达CF0F1-ATP合成酶分子组装.pdfVIP

高分子液晶态与超分子有序结构最新进展 and OrdewdStructures Adva，lce加PolymerLiqⅡ讨CrystalsSupramo如cular 生物马达CFoFl—ATP合成酶的分子组装 齐伟，段荔，李峻柏’ (中国科学院化学研究所，北京100080) 摘要ATP合酶是生物体内能量代谢的关键酶，也是自然界中最小的生物分子马达，具有从生物能量的产 生到纳米器件构建等一系列潜在的应用价值，成为当前诸多领域的研究热点．FoF．一ATP合成酶是跨膜蛋白， 磷脂膜是它存在和发挥功能的天然环境．我们将含ATP合成酶的蛋白脂质体组装到中空微胶囊表面，胶囊 为脂质体提供支撑，克服了蛋白脂质体不稳定和寿命短的缺陷，为ATP合酶的功能化研究构建了一个新型 的分子仿生体系．本文综述了我们研究小组在生物马达仿研究方面的系列工作．在质子势差驱动下，对重构 在胶囊外层膜内的ATP合酶的旋转催化功能进行了详细研究．当胶囊内外有一定的质子梯度存在时， CFoF。．ATP合酶旋转并合成ATP．利用荧光光谱仪跟踪监测了ATP合成过程中膜内外质子的变化，借助微弱 发光测量仪跟踪检测了ATP的产生．实验结果证明，ATP合酶重构在微胶囊外层后，表现出了很强的酶催 化活性，保留了其生物功能． 关键词生物分子马达CF。F1．A11P合酶；微胶囊；脂质体；葡萄糖氧化酶 近年来，随着分子生物学研究的不断深入，人们逐步认识到每一个细胞都是一个微观生物工厂， 它们拥有多种复杂的蛋白机器，利用这些蛋白的功能来完成多项与生命活动相关的任务，诸如细胞分 裂、物质输送及信息传递等等．其中一种执行特殊功能的蛋白就是马达蛋白，它们包含运动部分，可 以在生物刺激下呈现相应的运动，按其运动形式可分为线性运动马达(如肌球蛋白、驱动蛋白、动力蛋 细胞活动提供能量，是能量转化的核心酶，因此激发人们的兴趣开展生物马达ATP合成酶的仿生研 究，以期构筑具有信息存储与能量转化功能的纳米机器口一J． 的主要机理是通过跨膜质子动力势的产生来驱动ATP的合成．当质子流过F0的质子通道时，F0的亚基 旋转而带动F。的亚基旋转，从而导致F。的构象改变，这种构象的改变随着ATP的合成．反之，当ATP J． 存在时，F。能够水解A11P并带动F。亚基旋转，在膜两侧产生质子梯度．3 ATP合成酶是跨膜蛋白，磷脂膜是它存在和发挥功能的天然环境．含ATP合成酶的蛋白脂质体是 研究合酶结构与功能的理想体系一“1l，但是蛋白脂质体化学和机械强度较差，这在一定程度上限制了 它的应用．因此人们试图寻找合适的材料和手段改善蛋白脂质体的稳定性． 我们研究小组通过层层组装技术将蛋白脂质体铺展在组装的微胶囊外表面，模拟细胞膜的结构和 功能[1 21．微胶囊可为脂质体提供支撑，改善脂质体稳定性，同时也可利用胶囊内部空腔，为合成的 ATP提供存储空间． 将这种自组装技术应用到可被去除的胶体颗粒表面，在胶体粒子表面层层沉积聚电解质，然后将作为 模板的胶体颗粒溶除，制备了一类聚合物中空微胶囊．层层组装中空微胶囊的显著优越性在于能够对 胶囊的组成、厚度、结构性态、通透性能以及表面功能进行调控，所以在很短的时间内已得到了飞速 发展．到目前为止，组装的驱动力已从静电作用延伸到共价作用、氢键作用和疏水作用，组装的组分 国家自然科学基金(批准号20520130213)和国家基础研究项目(批准号：2007CB935900)资助． ·通讯联系人．E·mail：jbfi@iccas．柚．∞ 224 齐伟等：生物马达cFOF．．ATP合成酶的分子组装 也从最初的聚电解质拓展至无机纳米粒子、DNA和蛋白质等生物大分子．另外，近年来层层组装微胶 囊的应用研究也备受关注，尤其在作为药物或材料载体、微反应器及生物传感器等方面一卜15一． 我们的研究组首先从菠菜叶绿体中提取了cF。F，．ATP合成酶，然后利用表面活性剂介导的方法将 ATP合成酶重组到磷脂膜中，得到的蛋白脂质体再与层层组装的微胶囊结合，将含有ATP合酶的脂质 体组装到