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东北农业大学本科实验课程教学大纲 课 程 名 称：园林植物组织培养 英 文 名 称：Tissue Culture of Garden Plants 1. 理论课程编 号：02060 适 用 专 业：园林联合办学 理论课程总学时数：36 实 验 总 学 时: 18 学 分 ：1.5 开出实 验 个 数：6（验证实验5个、综合实验1个） 应开实 验 学 期：第七学期 2．实验课程简介 园林植物组织培养学是一门实验动手性非常强的学科，在学习理论的基础上，学会培养基的配制、外植体的选取、愈伤组织的诱导、植物的继代培养、生根培养、驯化、移栽及原生质体培养等。树立牢固的无菌概念。通过实验课深化课堂上学到的理论知识，能够把所学习的理论知识与实践相结合，学以致用。 3．实验教学目标及基本要求 通过实验课的学习，使学生们深刻理解课堂上学到的理论知识，人人都能够独立地完成实验，增强学生的动手能力。需要小组完成的实验，每名学生必须都要参加，增强同学之间的协作能力。 4．教材及主要参考书 《观赏植物组织培养技术》 中国林业出版社 《花卉组织培养》 中国林业出版社 《园艺植物组织培养》 上海科学技术出版社版社 5．考核办法 实验报告与作业占总成绩的30％。 实验大纲主撰人： 杨涛 （一）实验项目1 园林植物组织培养实验室参观和灭菌 实验特点： 实验类型：专业基础 试验类别：验证 计划学时: 3学时 每组人数：6人 首开日期：第八周 2. 实验目的与要求: 通过参观了解组织培养所需的主要仪器设备及组织培养与其它实验的特殊性。 3. 主要仪器设备: 序号 主要仪器设备名称 型号规格 数量 1 进口超水器 TKA 1 2 高压灭菌锅 YXQ-SG46-280S 2 3 超净工作台 智城 2 4 冰箱 海尔 2 5 天平 岛津 2 6 酸度计 塞多利斯 2 4. 实验内容提要: 主要讲解组织培养中所需要的主要仪器、设备的使用及功能，为学生们进入实验室有一个充分的认识。同时对实验室进行卫生清理及灭菌，为进一步实验打下基础。 5. 实验操作要点：各种仪器性能需着重记忆。 6. 注意事项：无菌室需特别注意无菌。 （二）实验项目2 MS培养基母液的配制与保存 实验特点： 实验类型：专业基础 试验类别：验证 计划学时: 3学时 每组人数：6人 首开日期：第九周 2. 实验目的与要求: 通过对组织培养中最常用的培养基配方MS基本培养基的配制，学会配制药品的一些基本方法和原理。 3. 主要仪器设备: 序号 主要仪器设备名称 型号规格 数量 1 进口超水器 TKA 1 2 冰箱 海尔 2 3 天平 岛津 2 4. 实验内容提要: 主要讲解MS母液配制中大量元素、微量元素、铁盐、有机成分、激素等如何配制及注意事项。 5. 实验操作要点：小量如何称量。 6. 注意事项：电子天平需要预热。 （三）实验项目3 MS固体培养基的配制及器械和培养基的灭菌 1．实验特点： 实验类型：专业基础 试验类别：验证 计划学时: 3学时 每组人数：6人 首开日期：第十周 2.实验目的与要求：掌握MS固体培养基的配制方法及湿热灭菌法的原理及步骤。 3.主要仪器设备： 序号 主要仪器设备名称 型号规格 数量 1 酸度计PHBJ-260 6 2 高压灭菌锅 YXQ-SG46-280S BCD-518WS 2 4.实验内容提要：母液的称量、加激素、加琼脂、加蔗糖、定容、溶解和调PH值、分装及高压灭菌。 5.实验操作要点：调PH值一定要求准确。 6.注意事项：高压锅的使用要规范。 （四）实验项目4 无菌操作技术 1.实验特点： 实验类型：专业基础 试验类别：验证 计划学时: 3学时 每组人数：1人 首开日期：第十一周 实验目的与要求：通过本课实验，使同学们掌握组织培养的无菌操作技术。 主要仪器设备： 序号 主要仪器设备名称 型号规格 数量 6 高效节能培养架 WN-6 1 进口超水器 TKA 1 2 高压灭菌锅 YXQ-SG46-280S 2 3 超净工作台 智城 2 4 冰箱 海尔 2 5 天平 岛津 2 6 酸度计 塞多利斯 2 实验内容提要：实验设计、外植体的选取、培养基的制备、接种。愈伤的诱导、中间繁殖体的增殖和壮苗生根、试管苗的驯化、移栽。 实验操作要点：接种器械一定要交替灭菌，避免交叉污染。。 注意事项：时刻牢记无菌。 （六）实验项目6 园林植物胚培养 （任选） 1．实验特点 实验类型：专业基础