杨树多基因遗传转化体系的建立及优化.pdfVIP

中国荩学c萋握 2015，31(1)：43—46 ChineseAgriculturalScienceBulletin 杨树多基因遗传转化体系的建立及优化 朱永兴 ，张 岩 ，吴 昊 ，武东坡 (宁夏农林科学院农业生物技术研究中心，银川750002；宁夏农业综合开发办公室，银川750000) 摘 要：为建立多基因遗传转化体 系，以 宁‘杨 1号’为转化受体材料 ，建立杨树多基因遗传转化体系，并 对SOS1、SOS2、SOS3进行 了共转化。研究结果表明：MS+6BA1．0nag／L+NAA0．5mg／L为最适不定芽 分化培养基；最佳的农杆菌侵染浓度为OD~=O．4，最适除草剂筛选浓度为0．8rng／L。建立了最佳的 ‘宁 杨 1号’多基因遗传转化体系，获得 l4株PCR阳性株系。 关键词：宁‘杨 l号’；农杆菌；多基因；遗传转化 中国分类号：Q786 文献标志码 ：A 论文编号：2014．1668 EstablishmentandOptimizationofMulti-。geneTransformationSystem ofPopulus ZhuYongxing，ZhangYan，W uHao，W uDongpo (ResearchCenterofAgro—biotechnology,NingxiaAcademyofAgriculturalSciences，Yinchuan750002； ZNingxiaAgriculturalComprehensiveDevelopment e，Yinchuan750000) Abstract：Inordertoestablishandoptimizethemulti—genetransformationsystem ofPopulus， N‘ingyang No．1’wasusedasacceptormaterial，andmulti—genetransfomr ationsystem wasestablished．SOS1，SOS2and SOS3genesrelatedtosaltresistancewereCO—transfomr ed．Theresultsshowedthatthemostsuitba lemedium ofadventitiousbudwasMS+6一BA 1．0mg／L+NAA0．5mg／L．themostsuitablescreeningconcentrationof herbicidefortheleafpiecewas0．8ms／L，andthemostsuitableagrobacterium suspensionconcentrationwas OD6oo=0．4．The14linesofPCRpositivewereobtainedusingthissystem． Keywords：N‘ingyangNo．1’；Agrobacterium,multi—gene；transfomr ation 0 引言 得尤为重要，因此，笔者通过建立并优化杨树的多基因 杨树(Populus)是世界中纬度地区广泛栽培的主要 遗传转化体系，为今后通过基因工程手段改 良杨树的 造林树种之一，它速生、美观、木材纤维高、抗病抗虫性 功能特性奠定基础。 强、造林成活率高、木材用途广泛，具有重要的栽培价 1材料与方法 值和开发潜力。为开发利用盐碱荒地，需培育耐盐品 1．1试验材料 种 “1。常规的育种方法培育耐盐碱 品种，培育周期长， 1．1．1受体材料 宁‘杨 1号’无菌幼苗，由农科院生物 且效果并不显著。利用基因工程技术培育耐盐碱杨树 中心实验室保存。 新树种，是提高盐渍化土地利用率的有效手段 ]。而 1．1．2 质 粒 及 农杆 菌 三 价 质 粒 MT(SOS1一SO