原创力文档- 1、本文档共2页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
PBl6 217
解螺旋酶DrRecQ功能结构域HRDCl的结构和功能研究
刘珊珊1，张雯2，明倩倩1，高增强2，侯海峰2，蓝文贤1，董宇辉2，曹春阳1
f1．中国科学院上海有机化学研究所生命有机国家重点实验室，上海200032：
2．中国科学院高能物理研究所，北京同步辐射光源，北京100049)
耐辐射球菌D．radiodurans拥有高效精确的DNA修复系统，这使它可以在强辐射环境
重要组成部分，研究表明，HRDCl在DrRecQ全长蛋白和DNA的结合中发挥了作用。我们
用核磁共振方法解析了HRDCl的溶液结构，并用荧光偏振方法测定了几个不同结构域与各
种DNA的解离常数，考察了它们在结合DNA时的作用。HRDCl的溶液结构显示其整体拆
叠和已报道的其它物种的HRDC结构域的类似。蛋白由6个a螺旋组成，图示的残基形成
疏水核心，它们之间的疏水相互作用将蛋白的构象固定。经过序列比对，发现这些残基在其
它物种的HRDC中是高度保守的。同时，我们测定了HRDCl，突变体HRDCl
K553A，
dsDNA和3-OHdsDNA(由18单链和30单链退火而成)的结合常数。结果
dsDNA．30-bp
如图所示，表明HRDCl和5种DNA的结合较弱，KD在几十“M左右，属于较弱的结合强
度。三个突变体相对HRDCl，其Ko均有所降低，说明这些残基所在位置是蛋白和DNA的
HRDCl
作用区域。RQCHRDCl和DNA显示较强的结合，在几百nM左右，并且，将RQC
HRDCl HRDCl
上HRDCl部位的残基突变后(RQCH564A，RQCR575A)蜘值几乎没有
HRDCl类似，说明N端的helicase未参与DNA的结合。
DNA的结合强度和RQC
旧 ‘哆
*一…(玉至二][玉互]匹匦)m
l
一．—ct “t亘匾]叵五]-一；
j
一， m屯亘》“。 ]芝．i 些～
筐一 壁一 LE～一
I{坦；罡|芏
￡；[
结合常数测定)
+通讯联系人：曹春阳：电话：021E—mail：ccao@一sioc．ac．en；
董宇辉：电话：010Email：dongvh(,ihep,at．on
218 PBl6
Structural N-terminalHRDCdomain
intothemost
insight
of helicasefromDeinococcusradiodurans
RecQ
Shanshan
Liul8，Wen Hou2，Wenxian Wul，
Zhan92吒ZengqiangGa02，QianqianMin91，Haifeng Lanl，Houming
Caok，Yuhui
Chunyang Don92*
(1．
文档评论（0）