藤黄灰链霉菌ECO+00001产生的大环内酯抗生素寡霉素A与C的分离纯化及抗真菌活性.pdfVIP

第七届全国新农药创制学术交流会论文集 藤黄灰链霉菌ECO 纯化及其抗真菌活性· 李铭刚1杨佩文2李一青1尚慧2赵江源1刘树芳2崔晓龙1李家瑞2文孟良卜‘ ‘。云南大学生物资源保护与利用重点实验窒。昆明，650091；’云南省农业科学院农业环境资源研究所。昆明。650205) 摘要：运用各种色谱方法，从藤黄灰链霉菌ECO00001的次生代谢产物中分离得到抗真菌的活性化合 物I和II．经过各种波谱分析，分别将化合物I和II鉴定为大环内酯抗生素寡霉素C和A．化合物I和 II均具有离体抗水稻稻瘟病菌，水稻恶苗病菌，烟草赤星病菌、百合炭疽病菌及百合灰零病菌的活性． 关键词：藤黄灰链霉菌；寡霉素A；寡霉素C；抗真菌 大量研究表明，通过生物合成的微生物次生代谢产物的化学结构极其复杂和多样化，它们不仅以独特 的作用机理作用于靶标生物，而且具有内在的生物可降解性，低残留的明显优势，在有效防治作物病害的 同时对非靶标生物的副作用较小…．因此可以从微生豺次生代谢产物中开发出高效的杀菌剂，以克服由 许多老品种合成杀菌剂引致的抗性和污染问题。放线菌是各种抗生素的最丰产微生物，它产生如氨基糖苷、 蒽环、糖肽、B一内酰胺、大环内酯、核苷、肽、多烯和聚醚等作用机理独特与结构多样化的抗生素，其 产生的抗生素占天然抗生素的四分之三u1．尤其值得注意的是，链霉菌产生的新抗生素在数量和结构多 样性方面均超过放线菌的其它属，特别是在农业上使用的抗生素中，约60％分离自链霉菌，表明链霉菌拥 有更强的新抗生素合成能力Ⅱ1．在筛选农用抗生素的过程中，本实验室从采自云南省元阳县的土壤样品 株编号ECO00001．通过离体筛选模型追踪，运用各种色谱方法从该菌株的茵丝体中分离得到抗真菌活性 化合物I和II；经过各种波谱分析，分别将化合物I和II鉴定为大环内酯抗生素寡霉素C和A。 1材料与方法 1。1材料 ECO 1．1．1菌株：藤黄灰链霉菌Streptomyces]uteogrJseus00001，本实验室从采自云南省元阳县 的土壤样品中分离筛选得到，经16SrDNA测序及比较分析，将该菌株初步鉴定为藤黄灰链霉菌 烟草赤星病菌在PSA培养基上培养，稻瘟病菌在燕麦培养基上培养． 1．1．2培养基：A．斜面培养基：酵母膏4g，葡萄糖4g，麦芽膏5g，复合维生素5mg，微量盐l mL，琼脂20 mL，pH7．2；B．种子培养基：酵母膏4g，葡萄糖4g，麦芽膏10g，复合维 g，水1000 生素3．5 mL，定容至1000mL。pH7．2；C．发酵培养基：大豆粉20g。蛋白胨2g，葡萄 mg，微量盐l 4 0．5 2 mL· 糖20g，淀粉5g．酵母青2g，NaClg，l【z盱0．0．5g，MgS04．711zOg，CaC03g，水1000 pH7．8． 1．1．3仪器及设备：50L全自动发酵罐(BioengineeringAG)：JZ口-Y振荡仪(东联电子技术发展有 Mnz Nicolet)： 1．2方法 ”通讯作者：文孟良．博上．教授，从事微生物源新农药研究．mlwen@ynu．cdu．c11 第一作者：李铭刚(1972--)．男。云南个旧人，博士．副研究员，从事微生物源新农药研究． ’ 318 第七届全国新农药创制学术交流会论文集 mL(含 1．2．1发酵：将菌株从牛奶管中接种于斜面培养基，280C培养7天：孢子成熟后，接种