沉默EZH2表达逆转人非小细胞肺癌顺铂耐药性.pdfVIP

· 1084 ‘ 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2014Aug；30(8)：1084～90 网络 出版时间：2014—7—1016：51 网络 出版地址 ：ht：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．0214．08．010．html 沉默EZH2表达逆转人tPd,细胞肺癌顺铂耐药性 饶进军 ，何关生 ，毛 楠 ，钟小懿 ，吕 琳 ，王文雅 (1．南方医科大学药学院，广东广州 510515；2．广州医科大学附属第二医院药学部，广东广州 510260； 3．广州市番禺中心医院药学部，广东广州 511400) doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．010 EZH2的表达并未引起细胞发生明显的凋亡现象，但 G。／G。 文献标志码：A 文章编号：1001—1978(2014)08—1084—07 期比值明显升高 (从 0．53±0．08升到 0．84-I-0．09，P 中国图书分类 号：R329．24；R329．25；R329．28；R339．38； 0．01)，明显增加耐药株对顺铂 的敏感性 [Ic。从 (41．2± R734．2；R979．1 4．3)wmol·L 降低到 (19．4±3．3)Ixmol·L～，P0．o1]。 摘要：目的 探讨沉默EZH2表达逆转人肺癌顺铂耐药性的 细胞呈衰老特征 ，细胞衰老通路 的P14AR、P16 、P53、 作用及机制。方法 以实时荧光定量 PCR和 Westernblot P21、Rb表达上调，CDK1、CDK2、H3K27me3、E2F1表达下调。 法检测人非小细胞肺癌A549及其顺铂耐药株A549／DDP细 结论 沉默EZH2的表达能诱导A549／DDP细胞衰老，逆转 胞中EZH2的表达；以siRNA沉默EZH2的表达，MTT法检 其对顺铂的耐药性，其机制与调节INK4a／ARF／Rb衰老通路 测细胞增殖力；流式细胞术检测细胞周期分布与凋亡；3-半 有关。 乳糖苷酶染色法检测细胞的衰老；Westernblot法检测细胞 衰老通路 P14 、P16 、P53、P21、CDK1、CDK2、Rb、E2F1 关键词：肺癌；耐药性；siRNA；EZH2；衰老；细胞周期 和 H3K27me3的表达。结果 A549／DDP细胞 的EZH2在 mRNA和蛋白质水平上的表达均明显高于A549细胞。沉默 EZH2(enhancerofzestehomolog2)为多梳基因 (polycombgroupgenes，PcG)蛋 白家族的主要成员 收稿 日期：2014—03—18，修回日期：2014—04—21 之一，是H3组蛋 白第27位赖氨酸 (H3K27)的特异 基金项 目：广东省教育部产学研结合项 目(No2012B091100465)；广 性甲基化转移酶，调节组蛋 白H3的甲基化，对基因 东省自然科学基金资助项 目(No$2012010009368) 沉默和转录抑制发挥重要作用 J，其突出的作用是 作者简介：饶进军(1963一)，男，博士，副教授，研究方向：肿瘤药理 致 INK4a／ARF基因座启动子 H3K27me3形成，从而 学，通讯作者，E—mail：raojj@smu．edu．cn； 抑制 P14AR、P16 的表达 ，维护细胞的生长繁殖。