纳米材料潜在风险分析方法.pdfVIP

2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 纳米材料潜在风险的分析方法 王娜，程炯佳，金焰，毕树平+ (南京大学化学化工学院，生命分析化学教育部重点实验室，南京210093) 近年来，Science、Nature和Environmental 米尺度材料的生物效应，表明纳米材料对环境和健康的潜在影响以及纳米危害和安全性的研究已 经提升到相当的战略高度[1-4]。目前关于纳米材料毒性研究的范围己从宏观动物个体或细菌扩展 到器官、组织、细胞、分子甚至基因。纳米材料对宏观动物个体或器官影响的研究多采用吸入法 或注入法，一般会设立阴性和阳性对照组，对实验动物培养一段时间后，将给药组和对照组进行 统计学分析后做各方面的对比。而纳米材料对细胞影响的研究方法则较多，最常用的方法是MTT 比色分析法，除此还有显微技术、彗星电泳、生化指标表征、细胞计数、荧光染料探针等技术。 本文对近年来报导的研究纳米材料与细胞相互作用的主要分析方法及其特点进行总结分析(详见 表1)，以期为今后这方面的工作开展奠定基础。 1MTT(噻唑蓝)比色分析法 通过生成溶于二甲亚砜的甲瓒量的多少间接反映细胞生长及增殖活性，再通过统计学显著性 分析就可以初步判断纳米材料是否具有细胞毒性。这是研究纳米材料对细胞影响的最普遍的方法 之一。 2显微技术 显微技术的突出特点是可以进行细胞形态的直接观测。通过将纳米材料作用于细胞前后的照 片进行对比，定位纳米材料在细胞中的具体位置，这样一方面可以为以后研究纳米材料与生物分 子的作用提供指导方向，另一方面也可表征纳米材料是否具有跨膜性或对细胞膜是否有破坏性。 3彗星电泳 该法通过纳米材料与细胞作用后所产生的断链和碱基变性片段的多少来看DNA的损伤程 度，而这种损伤可通过迁移部分的光密度或迁移长度而定量的测定。 4生化指标表征 设立实验对照组，通过生化指标如部分酶活力或溶血率的变化等，做统计学处理后反映纳米 材料对细胞的毒性，与研究纳米材料对宏观动物个体或器官影响的分析手段有相似之处。 5细胞计数法 设立实验对照组，通过染色等处理后对实验前后细胞数目进行统计学分析，以此来反映某种 纳米材料的细胞毒性或比较不同种纳米材料毒性大小的差异。 ‘通讯联系人 41 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 6荧光染料探针 用荧光染料进行染色后，结合荧光显微技术测定细胞质膜损伤及内部离子浓度变化的动态过 程。 旦坐! 些箜婴垦巴!尘鲤!垫垒2蛐!堕堕业垒型29塑!!丝!!!Q!塑垫望坚型型型!【!：!Q】 研究方法 研究的纳米材料 研究的生物体系 参考文献： A，XiaT，MadlerL，et [1]Nel a1．Science，2006，311(5761)：622． G 【2】BrumfielNature，2003，424(6946)：2246． J BAet 【3】BermudezE，MangumB，Wong Sciences，2004，77(2)：347． a1．Toxicological H a1．Environmental 378． F，YahL，et [4]JiaG，Wang 【5】李倩，唐 萌，班婷婷等．中国公共卫生，2005，21(5)：589． K，et 057． 【6】Ombek-JaworskaH，Nejman只Czuminskaa1．Carbon，2006，44(6)：1 a1．Nano