血红蛋白催化光度法测定抗坏血酸.pdfVIP

第30卷。第1l期 光谱学与光谱分析 V01．30，No．11，pp387—388 201 and November，2010 0年11月 SpectroscopySpectralAnalysis 血红蛋白催化光度法测定抗坏血酸 张 璐1，季米娜2，柴亚辉1，徐利涛1，李鹏1，王瑞勇n 1．郑州大学化学系，河南郑州450001 2．郑州大学护理学院，河南郑州450052 摘要基于血红蛋白作为过氧化物模拟酶在仿牛催化体系中的作用，通过对血红蛋白催化过氧化氢氧化 邻苯二胺的体系的紫外可见吸收光谱研究，初步探索研究了体系的最佳条件及动力学行为，。在痕量抗坏血 酸存在下能明显提高体系的吸光度，测定的线性范围为1．0×10-9_2×10-8mol·L一，线性相关系数为 0．999 6，据此建立了测定抗坏血酸的催化光度光度法。 关键词血红蛋白；催化光度法；抗坏血酸；邻苯二胺 文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2010)11—0387—02 抗坏血酸(AA)是维持机体正常生理功能的重要维生素 之一，但人体内不能自身合成，只能从食物中获取，因此各 种食品和药物中抗坏血酸的含量测定具有重要的意义。目前 ^ 毛 抗坏血酸的测定方法主要有电化学法[1]、荧光法[2]、分光光 ： 度法L3J、高效液相色谱法等。酶催化动力学光度法因灵敏度 、 《 吣 高等原因越来越受到重视。血红蛋白(Hb)具有和天然过氧 化物酶HRP相同的铁卟啉辅基，且价格低廉，故尝试以此 代替HRP催化过氧化氢氧化对邻苯二胺(()PDA)的反应， 建立H∞PDA—H202催化反应体系．发现低浓度下的AA O 2 4 6 8 OPDAconcentration／(10一t001．L。‘、 对Hb的催化反应具有活化作用，且吸光度与AA的浓度之№1 In订lle躲0fOPDA 5× 问具有良好的线性关系。据此建立了测定AA的紫外分光光 10—4 2X I．0× mol·L一1；llb10一‘tool·L-1；AA 度法。 10一。tool·L-15buffersolutionmL pH 3 1实验部分 1．1仪器与试剂 一 毛 721型可见一分光光度计(上海第三仪器厂)，抗坏血酸 ： 飞 (天津市凯通化学试剂公司)，牛血红蛋白(上海华硕精细化 《 吣 学品有限公司)，Mcllvaine缓冲溶液(NazHP04-C4H807· H20)，二次蒸馏水。 1．2实验