猪带绦虫基因工程疫苗地研究进展.pdfVIP

猪带绦虫基因工程疫苗的研究进展 才学鹏 (中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046) 【摘要】猪带绦虫病是一种重要的政治经济病。研制有效、安全的疫苗是该病研究的热点。随着分子生物技术的发展，基因 工程疫苗已成为该领域研究的重点。目前，猪带绦虫重组抗原疫苗、核酸疫苗和合成肽疫苗等研究已取得较大的进展，在噬菌体 疫苗和活载体疫苗等方面也做了许多尝试，取得了很好的效果。猪带绦虫重组抗原疫苗发展较快。有望在近几年上市，而其它类 型疫苗还有诸多的问题要解决，其商品化进程尚需很长一段时间。 猪囊尾蚴病虫作为一种重要的人兽共患寄生虫 猪带绦虫分为亚洲和非洲／拉丁美洲两个基因型。亚洲 病，不仅对养猪业造成重大的经济损失，还严重危害 基因型主要包括中国和印度等地方株，非洲／拉丁美洲 人类的健康。近期的流行病学资料显示，美墨边境猪 两个基因型主要包括墨西哥和厄瓜多尔等地方株。才 带绦虫病的感染率达3％，在美国加尼佛尼亚州部分 学鹏、贾万忠等根据羊绦虫45W设计引物，克隆了猪 A、B、C三型转录本共16个。 地区，猪囊尾蚴病的血清阳性率高达1．8％，表明猪带 带绦虫中国株TS045W 绦虫病有重新抬头的趋势。尽管驱虫药在控制猪囊尾 比较发现，猪带绦虫中国株和墨西哥株之间的 蚴和人绦虫感染中均发挥过重要作用，但化学药物的 长期使用出现的药物残留和对环境安全的危害的问题 保守，而其它的转录本之间都存在明显的变异。研究 证明，经过修饰的45W--4B不仅能在大肠杆菌中实现 日益突出。传统的全囊虫抗原、分泌，1弋谢(E／S)抗 原、异源抗原以及六钩蚴抗原疫苗都能对囊虫病起到 高效可溶性表达，表达产物在4稳定保存3个月，而 很好的预防作用，但都不能通过体外培养增殖，因而 且对猪的减虫率达94．0％以上。上述结果提示， 来源受到极大地限制。因此，研制安全、有效的基因 工程疫苗已成为猪囊虫疫苗的主要发展方向，经过二 具有广阔的应用前景。 十多年的努力，目前在该领域已取得了很大的进展。 以DIG标记的T018eDNA为探针，与猪带绦虫六 钩蚴表达文库杂交，筛选出TSOLl8克隆，与T018、 1重组抗原疫苗 TSAl8cDNA序列比较，TSOLl8eDNA3端非翻译区有 随着寄生虫生物学、免疫学和分子生物学等与疫 17个核苷酸的缺失，推测TSOLl8表达的蛋白可能具 苗开发相关学科研究的深入，用免疫化学分析方法鉴 有宿主保护性，具有开发实用疫苗的潜力。Flisser等 定宿主保护性抗原，应用重组DNA技术生产疫苗抗原 TSOLl8的大肠杆菌表达产物免疫猪，在三 用200斗g 已成为可能。同时棘球蚴和羊囊虫重组抗原疫苗的问 个独立的疫苗实验中均获得了几乎100％的保护。为 世，为其他绦虫病新型疫苗的研究提供了典范。 了提高重组TSOLl8抗原的稳定性，袁改玲等通过对 1989年Johnson等首先开发了羊绦虫(Zovis) TSOLl8基因修饰和对部分密码子的改造，实现了该基 重组45W抗原疫苗，对羊的保护率达98．O％。45W—GST因在毕赤酵母中的高效表达，表达量达2．59／L，而且 疫苗的效果已在新西兰得到确证，无论是自然感染或 表达产物分泌到培养液上清中，通过离心和凝胶层析 实验攻击感染的保护率都在90．0％以上。绦虫抗原具 即可得到纯化，而且该重组蛋白在酵母中进行了糖基 有明显的种间交叉保护性，提示用GST-45W重组疫化修饰，稳定性较大肠杆菌表达产物大打提高。用纯 苗抗原预防带科绦虫其他相