棉花体细胞胚发生机理地研究进展.pdfVIP

76 中国棉花学会2007年年会论文汇编 棉花体细胞胚发生机理的研究进展 商海红，刘传亮，张朝军，武芝霞，李付广’ (中国农业科学院棉花研究所，农业部遗传改良重点开放试验室，河南安阳455000) 摘 要：组织培养作为棉花细胞工程和基因工程的基础技术，在棉花遗传转化中有着极为重要的作 用；但是通过体细胞胚胎发生完成棉花的植株再生较为困难，有鉴于此，陆地棉体细胞胚胎发生机理 研究受到了广泛的关注。分别从起源方式、细胞学研究、生理生化变化、分子生物学等方面综述了棉 花体细胞胚胎的研究进展，并着重了介绍棉花体细胞胚发生的细胞学机制和分子生物学研究进展。 关键词：体细胞胚发生；细胞超微结构；生理生化变化；转录谱 棉花组织培养工作开展较晚，从1983年Davidonis获得第一株体细胞再生植株，随后棉花组织 培养工作发展迅速，己从多个棉种和外植体中获得了再生植株，并初步建立了完棉花组织体系，但目 前仍然存在胚胎发生率低、植株再生率低、基因型依赖等问题，这些对棉花的遗传转化造成很大困难。 因此，深入地研究陆地棉体细胞胚发生机理不仅对于揭示细胞分化、形态发生等具有重要意义；还可 hirsutum 以为陆地棉基因工程和突变体筛选等提供了良好的实验体系。由于陆地棉(Gossypium L．)体细胞胚发生在理论和实践上的重要意义，陆地棉体细胞胚胎发生机理研究受到了广泛的关注。 1 棉花体细胞胚的发生途径和起源方式 植物体细胞胚的发生途径可分为两种：直接发生途径与间接发生途径。直接途径是指体细胞胚 直接发生于外植体某些部位的体细胞，陆地棉组织培养中也有体细胞胚直接发生的报道[1]，此外，鸭 茅(DactylisglomerataL．)[2]、石龙芮(RanunculusSceleratus)[31离体培养中均报道了体细胞胚胎的 直接发生；但陆地棉植株再生大多通过间接发生途径完成。 体细胞胚起源方式有两种：单细胞起源和多细胞起源。研究数据更多支持陆地棉植株再生通过 单细胞起源完成[4]。间接发生途径中类似于合子胚的体细胞胚发生属于单细胞起源的主要依据是： 1)观察到了胚性愈伤组织中观察到单细胞从二细胞发育到四细胞原胚；2)丝状体和柄胚的出现L5。J。 但也有研究认为体细胞胚的起源方式为多细胞起源或者两种起源方式并存[8‘10|。胚状体起源部位因 植物种类而定，既有内起源又有外起源，陆地棉体细胞胚主要发生于近表层的愈伤组织内部口¨。 2 棉花体细胞胚发生和形态建成过程中的细胞学研究 2．1 细胞超微结构的变化 与这些模式植物比较，棉花体细胞胚超微结构研究相对薄弱，体细胞胚胎发生和形态建成过程中 细胞超微结构变化还未见系统研究。20世纪70年代报道过关于胡萝卜培养物的超微结构，20世纪 aestivum barbarumL．)[1 L．)[131等为材料 90年代以后，崔凯荣等以枸杞(Lycium 2|、小麦(Triticum 对体细胞胚发生过程中的细胞超微结构进行了观察。水晶掌(Haworthiacymbiformi)L1引、菊芋(Ci— chorium spp．)[153等的体细胞胚超微结构研究也有报道。 脱分化过程中，细胞质增加，叶绿体内膜系统趋于解体，转变为原质体。早期胚性细胞存在胞问 连丝，细胞核体积增大，核仁致密；线粒体数量明显增加，细胞中分布有少量小液泡，高尔基体、粗面内 质网、核糖体开始增多。胚性细胞发育到晚期，细胞核偏移，胞间连丝消失，细胞器数量增加，线粒体 含量增多。原胚胚体的细胞具有核大、核形状不规则等特点。梨形胚阶段胚体不同部位细胞在超微 结构上存在一定的差异，生长点部位细胞内质体中出现膜系结构，部分细胞内出现初级叶绿体，细胞 质中线粒体和大量游离核糖体分布较多，质体中有淀粉粒积累。 2．2 Cell 细胞程序性死亡(ProgrammedDeath。PCD) 植物合子胚发育过程中发生典型的细胞编程性死亡，助细胞、反足细胞、胚柄、原胚乳细胞等细胞 *，通讯作者：lifug@cricaas．corn．cn