鸭瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制与初步应用.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 泌液中的IgG主要来源于血清№17l，这—特点在本实验得到很好的验证，即所有途径免疫鸭消化道分泌 和IgA之间。说明IgM是免疫鸭消化道中的先锋抗体，在免疫鸭早期抵抗DFV对消化道黏膜的感染中 具有重要作用。[gO检出时间昂晚、滴度最低，呼吸道亦表现类似特征。十二指肠分泌液IgA抗体滴度 同期相比都较气管、食道及其它肠道分泌液高的主要原因，是由于十二指肠IgA浆细胞数量最多，且较 早接触DPV弱毒。说明十二指肠黏膜是免疫鸭消化道和呼吸道黏膜中抵抗DPV感染最强的部位。 2．3DPV弱毒免疫鸭血清和胆汁中的lgA、IgM和II晦发生规律 疫苗在免疫动物后，能否在最短时间内激活机体系统免疫功能，产生抗原特异性IgM抗体，在对 疾病的紧急预防中显得尤为重要；而能刺激机体产生高滴度和维持时间长的抗原特异性IgG抗体，是 评价一种疫苗质量的重要标准之一。本试验结果显示，DPV弱毒苗经不同途径免疫鸭后，血清中IgM 检出时间最早(第3天)，并均于第9天达到滴度高峰；随着IgM抗体滴度的降低，IgG抗体滴度逐渐 上升并均于第36天达到较高水平，至第60天检测结束时依然保持较高滴度。血清中DPV特异性IgM 降时，埯G滴度却上升并维持较长时间，较好地发挥了免疫接力棒的作用，而IgA在血清中出现时间 晚，滴度较其它两种抗体低，不是血清中的主要抗体，因此lgM和IgO是DPV弱毒疫苗诱导免疫鸭 含量的lo倍多。本研究在鸭体上也获得了与此相似的结果，实验检测到胆汁中抗体滴度由高到低为 重要来源。但鸭体胆汁中特异性抗体的免疫学意义并不清楚，其作用机制尚待进一步研究。 临床观察到的DPV弱毒疫苗口服免疫可有效避免母源抗体的干扰而获得更好免疫效果的现象， 但一直缺乏有力的证据，本研究结果显示气管和消化道中IgG含量最低，而母源抗体主要是IgO， 此结果在一定程度上很好地解释了这一现象。 程安春等根据弱毒进入鸭体后的繁殖特点从弱毒对强毒干扰作用的角度一定程度解释了DPV 弱毒疫苗快速产生免疫保护的机制。本研究在DPV弱毒疫苗免疫鸭后第3天即可由血液、呼吸道和 统免疫的角度得到一定程度解释。 参考文献(35篇，作者略) 鸭瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制及初步应用 齐雪峰1一，程安春1’2’3．-，，汪铭书1,2杨晓燕m，陈孝跃1 (1．四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心，四川雅安625014；2．动物疫病与人类健康四川省 摘要：DPV经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心、蔗糖密度介质离心制备纯化抗原，建 立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法，并对该法进行了标准化研究， 确定了最佳工作条件。在此基础上研制了相应的检测试剂盒并对盒内各组分的保存条件、质量控制 获得良好特异性和敏感性，l：100稀释的待检血清样品反应后oD柏5值换算为抗体滴度的标准直线 都很好．应用该试剂盒对皮下注射、口服和滴鼻免疫DPV弱毒的20日龄樱桃谷鸭血液中抗DPV特 异性IgG抗体滴度进行测定，结果表明：皮下免疫鸭于第6d、口服和滴鼻免疫鸭于第9d可在血清 中检测到DPV特异性抗体并于笫36d达到滴度高峰，且至60d时依然可检测到高滴度抗体．该试剂 盒可用于血清流行病学调查和鸭场DP免疫抗体水平的监测． 252 中国畜牧兽医学会动物徽生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 关键词：鸭瘟抗体：间接ELISA；试剂盒 and ofIndirectELISAl(itfor of DevelopmentApplication Detecting AntibodiesDPV Against 1rANG QIXue-fcn91’2CHENGAn．chunl’2。WANGMing-shul’2Xiao-yanl’2’’，CHENXiao-yue‘ (，．AvianDiseaseResearch Scienceand Medicine University,