香草兰的组织培养试验.pdfVIP

广东农业科学 2008年第 11期 35 香草兰的组织培养试验 文慧婷 ，张翠玲 ，吴 刚 (中国热带农业科学院香料饮料研究所 ，海南 万宁 571533) 摘 要 ：通过从种子一原球茎一丛生芽一完整植株的试验过程 ，筛选出较适合香草兰种子无菌萌发和丛生芽诱导增殖 的培养条件。结果表明：在温度 32～36cc的暗培养条件下，香草兰种子无菌萌发的最适培养基为VW+6一BA1．0mg／L+NAA O．1mg／L：诱导丛生芽的最适培养基为MS+6一BA3．0mg／L+NAA0．1mg,L，温度 (26~2)℃，光照强度 1500～2000lx、每天连 续光照 10h：诱导出的小芽在 1／2MS+NAA1．0mg／L的生根培养基上培养 20d左右即可长出2～4条根 ，生根率达 100％。 关键词 ：香草兰 ；无菌萌发；诱导；增殖 中图分类号：$682．31 文献标识码 ：B 文章编号：1004—874X(2008)11-0035—02 香草兰(Vanillaspp．)又名香荚兰、香子兰，是兰科 36℃等 3个温度处理下进行暗培养 。每个处理接种 9 香荚兰属多年生热带藤本香料作物 ，其豆荚经过发酵 瓶 ，每瓶约 200粒种子。 生香处理后为商品香兰荚 ，有 食“ 品香料之王”的美誉 ， 1．2 增殖培养试验 是国际上重要的食用香料原料，深受国内外不同人士 待类原球茎体萌发后，将其分别转接入 MS+6一 的重视和喜爱口-2]。香草兰原产于墨西哥 ，1960年开始 BA3．0mg／L+NAA 0．1mg／L、MS+6一BA 3．0mg／L+IBA 引入我国试种，在生产上通常采用扦插的方法进行繁 0．1mg／L、MS+6一BA 1．0mg／L+NAA 0．1mg／L、MS+6一 殖，但是，在杂交育种过程中，一定要用种子繁殖。本试 BA 1．0mg／L+ZT 1．0mg／L、MS+ZT 1．0mg／L+NAA 0．1 验采用由国外杂交的香草兰种子 ，通过无菌萌发快繁 ， mgCL培养基 中。然后将各处理置于温度 (26±2)℃、光 为选育香草兰优 良单株和品系以及更新国内生产用种 照x(每天连续光照 10h)的条件下诱导 提供 了科学依据。 出芽 。转接约28d后 ，整个材料开始形成由白变绿的 原球茎 ，并逐渐长大形成小芽 ；当小芽长至 1-2cm长 1材料与方法 时．将其切下转接入新鲜培养基中进行继代增殖培养 ， 1．1诱导培养试验 诱导丛生芽的形成；形成的丛生芽再分割成带 2～3个 选取长 2O～25ClTI的新鲜香草兰豆荚 (由中国热带 芽的小芽丛分别转接入新鲜培养基 中培养 ，诱导小芽 农业科学院香料饮料研究所提供)，先用 自来水清洗干 的分化 ；再将增殖培养 中不断分化出的小芽切分 ，转接 净，然后在超净工作台上用 70％酒精消毒 、无菌水冲 人新鲜培养基中，如此反复。 洗 1次 ，然后切开豆荚获取种子 ，备用 。 1．3 生根培养试验 1．1．1不同培养基对香草兰种子萌发的影响 将香草 当小芽长至 4cm、具 3—4片叶时 ，选取健壮小芽 兰种子分别接种于添加 了不 同浓度 6一BA、NAA、IBA、 并将其从丛生芽上单芽切下，转接入 1／2MS+NAA1．0 ZT的MS、KC、VW 基本培养基 (表 1)中，每个处理接 m L生根培养基 中，然后置于温度 (28-+2)℃、光强 种 18瓶 ，每瓶约200粒种子 。接种后将各处理置于温 2000～2500lx