dd狗骨髓间叶干细胞之骨诱导分化潜能的体外研究.pdfVIP

Chin J Oral Maxillofac Surg 16: 93-98, September 2005 ㆗華口外誌 狗骨髓間葉幹細胞之骨誘導分化潛能的體外研究 + + ＊+ 張燕清 夏毅然 史 ㆗ ＊國防㊩㈻院 生物及解剖㈻研究所 + ㆔軍總㊩院牙科部 口腔顎面外科 摘 要 年齡增長後，骨髓中幹細胞(MSCs)數量明顯減少。另外，年齡增長後骨折 癒合有明顯延遲情形，骨髓細胞骨生成能力和骨生成細胞增生明顯降低。臨床 上，autologous bone雖然可以提供 bone cell、骨誘導和應力支持，但 graft 量往往太少，形狀不吻合，無法完全吸收。異體移植則易造成免疫排斥和感染 等問題。對年長病人而言，則可能需要足夠 MSCs 才能有效促進或加速骨缺損 癒合。建立一個研究骨髓間葉幹細胞之大動物模式，以提供日後進行骨大缺損 或骨折等骨組織缺損進行有效修復/再生相關研究之用，是必要的。因此，本 研究旨在探討成年狗骨髓間葉幹細胞之骨組織細胞分化誘導及基質礦物化潛 能。實驗結果發現狗脛骨骨髓間葉幹細胞經 CD34 篩選分離出 CD 34-細胞進行 培養。培養過程加入誘導因子，可見細胞形狀由梭狀變成類造骨細胞之立方 形，並有顯著的鹼性磷酸酵素和第一型膠原蛋白表現。誘導 15 天時，可見造 骨細胞外基質開始進行礦物化，並形成骨群體。 本研究結果顯示狗骨髓 CD34-間葉幹細胞經分離、培養後，可被誘導分化 成骨細胞/組織。 關鍵詞 ：鹼性磷酸酵素，骨群體，間葉幹細胞，第一型膠原蛋白。 前 言 復。當然，另外，配合生長因子和細胞外基質 架構，更能㈲效加速修復的進行。幹細胞雖然 (1) 文獻報導 得知顯示在美國，每年約 150 存在許多組織㆗，但在成年㆟則主要存在於骨 萬㆟次骨折是由於骨質疏鬆所造成，台灣每年 髓㆗，MSCs 可經由體外分離、培養、給予㊜合 也大約㈲ 2 萬㆟次發生髖骨骨折(預估因骨質疏 因子(factors)誘導走向 osteogenic, chondrogenic 鬆所造成骨折發生㆟次，可由 1990 年之 170 萬 或 adipogenic 等方向而形成骨、軟骨或脂肪等組 ㆟次㉃ 2050 年時增高㉃ 600 萬㆟次以㆖) 。發生 織(2) 。MSCs 應用在動物實驗㆗進行骨、軟骨、 骨折後，輕微的話造成局部功能喪失，嚴重時 肌肉等組織修復，均㈲不錯效果(3-6) 。利用gene 甚㉃㈲生命之危險。 所以，組織(例如：骨骼) therapy 實驗，也證實對 osteogenesis imperfecta 缺損後，最主要是藉由鄰近細胞或其前身細胞 ㈲很好的療效(7-9) 。因此，如何㈲效㉂㆟或動物 甚㉃需要組織幹細胞(stem cells)或間葉幹細胞 骨髓㆗分離 MSCs 在體外 expand (以及調控成所 (mesenchymal stem cells, MSCs)來㈿助組織之修 需的細胞)是值得㊟意的。MSCs 如何㈲效㆞在組 － 93 － Chin J Oral Maxillofac Surg