根癌农杆菌介导的甜瓜遗传转化.pdfVIP

浙江农业学报 ActaAgricalturaeZhejiangensis21(3)：211—214，2O09 根癌农杆菌介导的甜瓜遗传转化 方 丽，任海英，茹水江，王汉荣 (浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，浙江 杭州，210031) 摘 要：以甜瓜子叶为根癌农杆菌介导转化的受体，通过 GUS基因瞬间表达率的分析，研究影响转化体系的 重要试验参数。试验结果表明，甜瓜对卡那霉素耐性高，筛选浓度可高达 150mg／L，AS 能促进转化率，而AS 不能促进转化率。前期的消毒效果与季节有很大的关系，不同季节选择不同的消毒方式更能节约种质资源。 关键词：甜瓜 ；农杆菌；遗传转化；GUS瞬间表达 中图分类号：$652；Q785 文献标识码：A 文章编号：1004—1524(2009)03—0211—04 Agrobacterumtumefaciens-mediatedgenetictransformationinmelon FANGLi，RENHal—ying，RUShui-jiang，WAN GHan—rong (Instituteofplantprotectionandmicrobiology，ZhjiangAcademyofAgriculturalSciences， Elg『z^ou310021，Ctana) Abstract：TheexperimentalparameterswereinvestigatedinAgrobacteraum —mediated tm~ ommtionofmeloncotyldeons basedon thetransientexpression rateof GUS gene．Theresultshowde thatmelon coytldeons hadlligh tolerance to Kanamyeinwiht concentrationof150mg／L．whichwasusedtoscreenthecotyldeonofmelonaftertransformation．Addition 0fAg intoeocuhivationmedium Was morebeneficialforimprovingtransformationfrequency，however，acetosyringone (AS)Was useless．Thedifferentdisinfectionmehtodsshouldbetakenaccordingtodifferent$,~tSOns ofrsavinghtemelon seeds． Keywords：melon；agrobacteriumtumfaciens；genetictransofrmation；gustransientexpression 甜瓜 (CucumismeloL．)清甜爽 口，营养丰 等转基因作物商业化种植 引【。全球已有超过 13 富，是人们喜爱的果品之一。随着农业产业结构 种转基因作物，种植面积超过 1．143亿 bin212]。 的调整，甜瓜生产迅速发展，栽培制度及栽培生 根癌农杆菌作为一种天然的载体系统具有寄主 态环境的改变使得甜瓜病害逐年加重，尤其甜瓜 范围广、转化效率高等优点被广泛的应用到植物 枯萎病、蔓枯病等病害，给甜瓜生产带来了巨大 基因转化中。目前已有抗黄瓜花叶病毒的转基 的损失_lJ。由于缺乏有效的抗病品种，传统的栽 因甜瓜进入中试L3J。 培育种技术周期长，并局限于原始的种质资源。 自20世纪 90年代 以来，有关黄瓜、西瓜、葫 转基因技术作为一种快捷便利的基因改造工具， 芦、甜瓜等的遗传转化已有许多报道 ]，但不 已经越来越多的为人们所接受。截止2007年，我 同的甜瓜基因型遗传转化体系和转化效率有很 国已经批准了棉花 、番茄 、番木瓜 、甜椒和矮牵牛 大差异，甜瓜作物遗传转化 “高效”问题尚未很好