β-catenin与APC蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义.pdfVIP

第二届中国现代医学研究方法暨学科交叉创新研讨会论文汇编 低氧环境的微囊内良好存活；同时也说明ACA微囊具有良好的免疫隔离作用。另外，可能是排斥反应发 生时罗非鱼肝细胞对一些可通过微囊孔径的小分子抗原物质并不发生免疫应答，因此得以长期存活。 13I—catenin和APC蛋白在原发性胆囊癌中的表达及 蚌埠医学院附属医院肝胆外科(233004)刘会春金浩 胆囊癌是胆道系统的恶性肿瘤，其发病隐匿，早期诊断困难，恶性程度高、进展迅速，治疗效果差。 胆囊癌的发生、发展是多因素、多基因参与的多步骤过程，涉及许多癌基因、抑癌基因的突变。因此人 们一直致力于胆囊癌的分子生物学研究，力求从分子生物学角度阐明胆囊癌的发病机制和生物学特性。 号时，新合成的B—catenin与胞浆中多种蛋白包括APC、GSK一3B、axin等组成的“降解复合物”结合， axin和APC提供一个使GSK一3B能够使B-cateninN}12端的丝／苏氨酸残基磷酸化。被磷酸化了的B 并进而进入细胞核内。它以何种方式进入核内目前尚不清楚。在核内无B—catenin时转录因子家族的 TCF／LEF(T—celltranscription factor／lymphoidenhancerbinding IL一8等。细胞异常增生、组织结构异常，进而导致肿瘤的发生。 人们在对家族性结肠息肉的研究中发现了APC基因，因而命名为腺瘤样结肠息肉易感基因 (adenomatous polyposiscoll)。因APC基因在腺瘤息肉病和许多肿瘤中均有突变而被认为是一种抑癌 基因。B一连环蛋白在GSK一3的磷酸化作用下与APC氨基端的两个模体相连，当去磷酸化后则解离到胞浆 中，并可到达细胞核与活化转录因子作用，引起靶基因表达和细胞增殖；APC的抑癌功能正是通过结合 B一连环蛋白进而抑制细胞增殖实现的。当APC基因突变后，截去顶端的APC蛋白不能与B一连环蛋白牢 固结合，使后者的胞浆中游离量增加，引起肿瘤的发生和生长。 其在胆囊癌中研究很少，B—catenin及APC在胆囊癌发生，发展过程中的协同作用尚未见报道。本实验 通过检测在胆囊癌中的表达情况，分析它们的表达规律和相互之间的关系。期望可以为进一步阐明胆囊 癌的发病机制，并为将来针对胆囊癌的药物治疗、基因干预治疗研究提供理论依据和实验基础。 材料与方法 一、材料 1．标本来源挑选蚌埠医学院附属医院普外科和肿瘤外科在2002年1月至2006年6月手术切除且 远处转移者32例，无转移者18例。合并有胆囊结石者2l例，无胆囊结石者29例。所有胆囊癌均为原 发性，术前未进行放化疗，有完整的临床病理资料。另外从蚌埠医学院病理科存档石蜡标本中选取20 第二届中国现代医学研究方法暨学科交叉创新研讨会论文汇编 例胆囊腺瘤和20例慢性胆囊炎组织标本作为对照。 二、方法 1．实验方法将每一石蜡组织块用组织切片机做成4um厚的连续组织切片4张，贴附于处理好的载 玻片上，放入60℃恒温箱内烤片24小时。免疫组化染色步骤按有关说明进行。 ％的细胞膜表达视为B-catenin正常表达，细胞浆，细胞核表达及阳性细胞数90％的细胞膜表达视 为异常表达。APC染色呈现棕黄色至棕褐色，位于细胞浆口1。结果判定标准参照shimizu方法：阳性细 胞数：无阳性染色=0， 阳性细胞数I／3=1，阳性细胞数2／3=3，阳性细胞数在1／3—2／3之间=2； 7染色强度：无着色=0，强染色=2，中度染色(介于O~2之间)=1；前述二分值相加为最后结果，即0 为(一)，2为(+)，3为(++)，4为(+++)。 3．统计学分析所有数据均采用SPSSll．0统计软件包进行统计分析，样本率比较采用x2检验和 Fisher’S确切概率法，等级资料中多样本比较采用Kruskal—Wallisn法秩和检验，两样本之间比较采 统计学意义的判断标准。 结果 一、B—catenin在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中的表达 1．B--catenin在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中的表达情况 B-catenin阳性染色呈黄棕色，细胞膜表达为正常表达，细胞浆，细胞核表达及阳性细胞数90 ％的细胞