高复制HBV转基因小鼠建立和应用研究概况.pdfVIP

TH Symposium of the 5 International Conference on Transgenic Animals 那就是有一端序列不受病毒自身调控序列的控 LoxP-HPV-LoxP 结构 这样可以保证在有Cre 制 具体到HPV 就是URR 这可能就是HPV16 酶表达的情况下 整合的HPV 基因组可以从宿 头尾相连的双拷贝转基因小鼠不仅产生皮肤肿 主染色体上解离下来 再次 在 瘤 还发生了恶性淋巴瘤且广泛转移的原因 LoxP-HPV-LoxP 结构的上游和下游分别引入 [14] CMV 和EGFP 见图4 使得在HPV 基因组 再次 整合的基因组能够从宿主染色体上 解离下来(发生自身环化 见图5)后 CMV 与 解离下来 高危型HPV 和低危型HPV 在致病 EGFP 相连(见图6) 启动EGFP 的表达 哪个 过程方面存在本质差别 前者的基因组往往整 细胞的HPV 解离下来 哪个细胞就可以检测到 合到宿主的染色体上 引起宿主细胞的恶性转 绿色荧光 化 而后者的基因组则通常游离于宿主染色体 在引入Cre 酶的方法上 不采用Cre 转基 之外 使宿主细胞良性增生 只有在少数恶变 因小鼠与CMV-LoxP-HPV-LoxP-EGFP 转基因 的细胞HPV 基因组才呈整合状态 转基因动物 小鼠交配的方法 而是将Cre 基因构建到腺病 中 转入基因均呈整合状态 这势必不能模拟 毒上 并且在Cre 上游引入上皮组织特异性的 低危型HPV 的感染 而对于高危型HPV 感 hK14 启动子 形成hK14-Cre 结构(见图7) 这 染起始阶段其基因组也处于游离状态 通常转 样可以用腺病毒感染转基因小鼠 人为的控制 基因动物也不能模拟这一阶段的感染 可见 何时在哪个部位使 HPV 基因组可以从宿主染 只有使整合的 HPV 基因组从染色体上解离下 色体上解离下来 且只有在上皮细胞才解离下 来 才能更好更全面的模拟其复制和致病过程 来 最后 应该定向到上皮组织表达 HPV11 只感 4 展望 染人的上皮组织 很显然 理想的HPV11 转基 病毒结构虽然简单 但是将病毒基因组转 因小鼠也应该是只在其上皮表达 入动物体内 往往只是表达病毒的某些蛋白 3. 可行方案 得不到可复制的活的病毒 有时即使检测到了 鉴于目前的转基因构建方法均存在这样或 活病毒 动物也常常不表现人类感染该病毒的 那样的问题 我们在前人工作的基础上 仍采 疾病 原因当然是多方面的 从转基因的构建 用微注射的方法 但设计了一种完全不同的转 策略入手 尽量使转基因动物模拟人类感染病 基因策略 毒的过程 可能是解决这类问题的一个途径 首先 我们采用单拷贝的HPV 全基因组 以消除冗余序列的干扰 其次 在这个单拷贝 HPV 基因组的两侧 LoxP 位点 形成 0136 Establishment of high-copy HBV transgenic mice and its application (高复制HBV转基因小 鼠建立及应用研究概况) 刘光泽1 顾为望1 易学瑞2 杨富强2 任向荣2 南方医科大学实验动物中心 广州市510515 中国人民解放军第458 医院肝病重点实验室