不同的液化方法对痰液DNA提取效果比较.pdfVIP

检验医学2009年6月第24卷第6期 LaboratoryMedicine，June2009．Vol24．No6 麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌的上升趋 和治疗指南(草案)[J]．中华结核和呼吸杂志， 势，这与安群等 报道相似，认为与特殊部门中 1999，22(4)：201． 特殊病员对广谱抗菌药物的使用需求有关。同时 [3] 陈民钧，王 辉．中国重症监护病房革兰阴性细菌 耐药性连续 7年监测研究 [J]．中华医学杂志， 发现铜绿假单胞菌的耐药性较强，建议临床医师 2003，83(5)：375—381． 在选择治疗药物时应慎重，若尚急需，可以选择氨 [4] 王 晶，韩丽霞，张风华．院内感染洋葱伯克霍尔 基糖苷类或喹诺酮类药物。 德菌的分析 [J]．大连医科大学学报，2006，28(4)： 总之，随着大量抗菌药物的应用，细菌的耐药 329．330． 谱随之改变，导致临床经验性用药的失败。为此， [5] 张风华，王大利，靳 岩，等．鲍曼不动杆菌感染调 要加强菌种的鉴定与耐药性监测，以便为临床医师 查及药敏分析 [J]．大连医科大学学报 ，2006，28 尽早、尽快以及更准确地提供有效的信息。 (6)：489-491． [6] 安 群，高 岩．非发酵菌耐药性分析及抗菌药物 参 考 文 献 治疗对策[J]．中华医院感染学杂志，2005，15(5)： [1] 叶应妩，王毓三．全国临床检验操作规程[M]．第2 57l一573． 版．南京：东南大学出版社，2000：460． (收稿 日期：2008-07—22) [2] 中华医学会呼吸病学分会．医院获得性肺炎诊断 (本文编辑 ：姜 敏) 文章编号：1673~640(2009)06-0456-03 中图分类号：R446．5 文献标识码 ：A 不同的液化方法对痰液 DNA提取效果比较 张军力， 托 娅 ， 王育民 (内蒙古医学院附属医院临床检验中心，内蒙古 呼和浩特 010050) 摘要：目的 探讨不同液化方法对痰液中DNA提取的影响。方法 应用4种不同的痰液液化方法处理痰 液，即1molfL氢氧化钠振摇液化；1mol／L氢氧化钠80℃消化；Saccomanno法和二硫苏糖醇(DTF)法联合应用； 0．5％N一乙酸．L半胱氨酸、I．45％枸橼酸钠和2％氢氧化钠的液化剂振摇液化。对经4种方法处理的痰液分别 提取DNA，应用分光光度仪测量波长为260和280nm处的吸光度 (A)，计算 DNA浓度。结果 用Saccomanno 法和DTF法联合应用于痰液液化，其 DNA提取效果优于其他3种方法。结论 本研究为痰液作为呼吸系统疾 病分子诊断标本提供了前期处理的依据。 关键词：痰 ；DNA；液化方法 结核病的细菌学检测在结核病防治工作 中起 胞成分不易分离，高纯度及较大量的DNA提取存 着非常重要的作用 j。由于结核分枝杆菌生长 在着一定困难。我们采用了4种不同的痰液液化 时间较长，影响因素较多，使得结核病的诊断发展 方法，对痰液 中的DNA进行提取，并对 DNA的纯 较慢。但随着分子生物学的迅猛发展，结核分子