一株生物乳化剂产生菌和其发酵液乳化性能的初步优化.pdfVIP

★第五届青年海洋科学研讨会论文集★ 一株生物乳化剂产生菌及其发酵液乳化性能的 初步优化 单大鹏，李旭，产竹华，刘洋 361005) (国家海洋局第三海洋研究所，福建厦I’-1 摘要：本文对一株来自海洋的枯草芽孢杆菌B02及其产生的脂肽类表面活性物质进行研究， mN B02可以在无诱导剂的条件下将发酵液的表面张力降至31．0m一，与一般需要烷烃类诱 导荆才能产生表面活性剂的菌株相比具有明显优势。文中分析了B02具体发酵条件、表面 surface 张力、表面活性剂的乳化性能及稳定性等指标。实验中采用响应曲面法(response methodology，RSM)，以乳化系数为响应目标对该菌产脂肽类表面活性剂的发酵条件进行了 优化。首先利用Hacker．Burman实验从众多影响产脂肽的因素中筛选出影响显著的3个因 酵培养基优化，通过拟合得到响应曲面函数，获得最佳的理论实验条件，并通过实验进行了 验证。本文在研究B02所产表面活性剂的各项性能的同时也为对该菌株的进一步深入研究 提供了理论支持。 关键词：表面活性剂；脂肽；Plackea—Burman设计；Box—Behnken设计 引 言 1生物表面活性剂 生物表面活性剂是一类由生物产生的具有表面活性，即能显著降低液体表面张力或两相 间界面张力的化合物。其分子结构包括非极性的疏水部分和极性的亲水部分，因而具有两亲 性质【l2】，其疏水部分为饱和、不饱和或羟化的烃链；其亲水部分有多种形式如糖类、氨基 酸类、环状肽类、磷酸盐、醇等，它们一般都具有良好的降低表面张力和界面张力的性能。 生物表面活性剂由于具有两亲性，具有渗透、润湿、脱附、乳化、增溶、稳泡和消泡等 作用【3】，有助于溶解难溶的石油烃化合物，提高石油烃污染物的降解率，因而不论在石油开 采、石油污染的治理、工业清洗中都具有很好的应用前景【4l。本研究利用表面活性剂的乳化 性对发酵液的乳化能力进行优化提高，确定最经济的培养条件和培养基组成，筛选出适合工 业化生产的培养基配方，为工业清洗降低成本、提高效率提供应用和理论基础。 2利用统计学优化发酵培养基的方法 2．1Plackett-Burman法 法，是一种以不完全平衡块(balanced blocks)为原理的部分析因实验设计法； incomplete 它试图用最少的试验次数达到使凶子的主效果得到尽可能精确的估计，适用于从众多的考察 因素中快速有效地筛选出最为重要的几个因素，供进一步详细研究用。该方法不能考察各因 821 三、海洋资源开发与利用 子的交互作用，因此通常被作为过程优化的初步试验，来确定影响过程的重要因子。Willians 曾将该方法与随机平衡实验、部分因子实验相比较，认为Plackett—Burman法在筛选试验重 要因子方面最为有效和准确‘51。 2．2Box．Behnken响应面分析法 一种三水平的实验设计法，适用于2．5个因素的优化实验161。Box．Behnken法每个因素取三 种水平，以(．1，0，1)编码，根据相应的实验表进行试验后，对数据进行二次回归拟合，得 到带交互项和平方项的二次方程，最后在一定的水平范围内求出最佳值。由于这种方法的试 验次数均在因素数的4倍以上，一般均能获得良好的拟合结果。 1材料与方法 1．1材料 1．I．1菌株 菌株B02由作者所在实验室筛选于渤海，由本实验室保存。 1．1．2培养基 种子培养基和初始发酵培养基： 海水LB培养基 酵母提取物 59／L 胰蛋白胨 109／L 天然海水 1000ml pH 7．O 筛选培养基： 2216E培养基 酵母提取物