系列食品微生物多糖高黏度发酵关键技术.pdfVIP

·l58。 第147场中国工程科技论坛 =————=—==—=—=—==—=—==—=—=—==—=—==—=—=—==—=—=一 系列食品微生物多糖的高黏度发酵关键技术 詹晓北， 郑志永， 吴剑荣， 张洪涛 (江南大学生物工程学院／糖化学与生物技术教育部重点实验室，江苏无锡214122) 摘要：比较产热凝胶菌株生长和合成多糖阶段的能量代谢差异，特别是能量耗散的差异，构建了 土壤杆菌产热凝胶的代谢途径。研究产生能量代谢差异的原因及其影响因素，利用分子生物学技 术和生物信息学工具，构建了土壤杆菌电子呼吸链的传递途径。研究高密度培养、高强度生产的两 步法微生物多糖发酵工艺。在预备罐中以低C／N营养条件，实现产多糖微生物的快速高密度培 养。在发酵罐中稀释细胞后以高c／N营养条件高强度生产微生物多糖。研制工业规模下适用于 高黏度发酵的高效生物反应器。以结冷胶为高黏度发酵模型体系，研究该反应器在冷模条件下的 传质、混合和流变行为特征，设计了新型高效生物反应器，放大至50m3并应用于结冷胶发酵生产 实践中。 关键词：微生物多糖；结冷胶；热凝胶；代谢途径；生物反应器 微生物多糖是近年来利用现代工业生物技术开 能量效率远低于细胞生长过程的能量效率)，影响 发的新型产品，在食品、石油、医药等工业中具有广 着微生物细胞对氧气的有效利用∞“。。因此，若要 阔应用前景。虽然我国已成为黄原胶的第一大生产 提高目标产物的转化率和产率，就需要从产能途径 国，但高品质和高性能微生物多糖的生产仍与国外 进行代谢工程改造，以提高能量的产生效率或降低 先进技术存在较大差距：1)常规反应器的传质和混 能量代谢过程中的耗散。好氧细菌的能量代谢包括 合效率不能满足高黏度发酵的需要，气体分散效果 底物水平磷酸化和氧化磷酸化两个方面，而后者是 不理想，生产过程的能耗占成本的比重较大¨3； 能量产生的主要方面。迄今为止，对微生物多糖生 2)生产工艺以常规的分批发酵为主，产胶期的营养 产菌实施的代谢工程研究多着重于：1)解除多糖合 和能量供给结构没有与微生物的实际需求很好地匹 成途径的代谢调节。7o；2)过量表达多糖合成途径关 配。2。3。；3)微生物对氧的利用效率还有提高的空间， 键酶的水平¨1。除此之外，通过改善细胞膜的电子 不能物尽所用’…。因此需要从微生物菌种的代谢 传递效率或产能效率来提高目标产物生产率和转化 工程、发酵工艺和生物反应器等方面克服高黏度发 率也是另一可能的途径。从糖酵解的代谢调控机理 酵过程中存在的主要问题。 可知，微生物多糖合成的主要节点6一磷酸葡萄糖激 酶的活性受到细胞内的能荷的调控，当磷酸烯醇式 1 微生物多糖合成过程中的能量代谢 丙酮酸或ATP处于过量时，6一磷酸葡萄糖激酶的活 途径 性将受到抑制，此外，磷酸戊糖途径的葡萄糖一6一磷 酸脱氢酶受还原力NADH的抑制。这说明，当细胞 随着分子生物学和基因工程技术的迅速发展， 内的能荷处于高位时，一方面糖酵解和磷酸戊糖循 微生物多糖合成的遗传背景和代谢途径的研究正逐 环将受到抑制。…，代谢流将向微生物多糖合成的方 步深入。研究人员发现，微生物多糖在合成过程中 向流动。这表明保持细胞内的高能荷状态有利于微 存在着大量的能量耗散现象(即多糖合成过程中的 生物多糖的合成。 作者简介：詹晓北，男，教授，博士，江南大学生物工程学院工业微生物与生物反应工程研究中心主任，研究方向为发酵工程、生物反应 工程。 ’159· 詹晓北等：系列食