Dicer与siRNA和miRNA的作用机制.pdfVIP

维普资讯 命的化学 2007年27卷4期 · 310 · CHEMISTRYOFLIFE2007，27(4) ● MiniReview 文章编号：1000．1336(2007)04-0310．03 Dicer与siRNA和miRNA的作用机制 陈 双 汤 华 (天津医科大学天津市 命科学中心实验窒，天津300070) 摘要：Dicer(DCR)属于RNaseⅢ家族成员，大小约为200kD，是RNAi途径 巾的重要蛋 白质，其作用是将 dsRNA剪切成siRNA， 此外 DCR还参与了另外 一种非编码小 RNA：miRNA的7眵成，这两种小 RNA可以通过 与其 同源的靶 mRNA 的结合来抑制某些 特定基因的表达，即转录后基因沉默(post·transcriptionalgenesilencing，PTGS)。 关键词：DCR；RNAi；miRNA；siRNA 中图分类号：Q71 Dicer(DCR)属于RNaseⅢ家族成员，由DCR基因 包含2个反应中心，每个中心有2个氨基酸残基聚集 编码，在 siRNA和miRNA的产生过程中起着重要的 区，一个区域包含Glu、Aspm和Glu“。，另一个包含 作用。RNaseⅢ是双链RNA特异性核酸 内切酶，其家 Glu卵和Glu 。 目前 已经证 明_rdsRBD和RNaseⅢ结 族共分j类：第一类包括来源于细菌和真菌的RNase 构域参与了dsRNA的结合与剪切，PAZ结构域有助于 Ⅲ，含一个保守的RNaseⅢ结构域和一个与之相邻的 识别底物l1]。对PAZ结构域进行突变，可以明显地抑 双链 RNA结合区域(dsRNA—bindingdomain，dsRBD)； 制DCR的活性，而且这种抑制对包含有3’端悬垂的 第二类包括Drosha及其同源物，含相继的两个RNas dsRNA而言效应更强烈。这说明rDCR的PAZ结构 Ⅲ域和一个dsRBD，以及一段未知功能的氨基末端延 域参与了对 3’末端悬垂的识别。随着科学技术的迅猛 伸区域；第二三类是DCR及其同源物。DCR蛋白最早 发展，DCR陆续在其他生物体内发现，Provost等 克 在果蝇中发现，为一种约200kD的多结构域蛋白质， 隆的全长人DCR，分子量为218kD，具有核酸内切 含有5个结构域：1个DExH型ATP依赖的N末端解 酶活性及 dsRNA结合活性。DCR在生物进化过程中 旋结构域；1个 PAE结构域；2个RNaseⅢ结构域；1 具有高度的保守性，存在于多数生物体内，包括线虫、 个dsRNA结合结构域。DCR 以同源二聚体形式发挥 果蝇、拟南芥(Arabidopsisthaliana)和哺乳动物等体内 作用。DCR的二聚化主要是凭借其RNaseⅢ结构域。 均具有同源物 。 完整的RNaseⅢ结构域使dsRNA被E玎割成 12~15nt的 1．DCR与 siRNA 片段，是 siRNA长度的一半。二聚化的RNaseⅢ结构 1．1研究背号 RNA千扰(RNAi)是生物本身对dsRNA 入侵的一种进化性的保守反映机制，是转录后调控的 收稿 日期：2007—03—05 一 种重要途径，也称为转