恒场电泳检测DNA双链断裂及其应用.pdfVIP

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2017-08-12 发布于重庆
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恒场电泳检测DNA双链断裂及其应用.pdf

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恒场电泳检测DNA双链断裂及其应用.pdf

16 4 Vol. 16, No .4 1998 11 J. Radiat. Res. Radiat. Proces. November 1998 DNA (1) 李雨郑秀龙罗成基蔡建明孟祥顺吴玮高建国 ( 2004 ) ( 1) ( 6 00 8) DNA ( dsb) , DNAdsb , DNA , , , DNA ( dsb) DNA , DNA ( dsb) dsb , ( ) [ 1] 10Gy dsb, dsb, , , DNA 1 1.1 4 , , 7 200 , PBS , ( 2 ! 10 / ml) 1% 1/ ( v/ v) , 4 ∀ 10min , 0. 2! 0. 5! 0. 65 cm, 5 5 ! 10 1.2 PBS , 0. 8Gy/ min 1.3 7 ∀ 1.4 DNA ( 1% SDS, 0. 025 mol EDTA, 0. 01 mol T ris, 0. 5mg/ ml K, pH8. 0) 50 ∀ 24h, T E ( 1mmol EDTA, 10mmol Tris, pH8. 0) , 4 ∀ 1.5 DNA T BE ( 89mmol Tris, 89mmol , 2mmol EDTA, pH8. 0) 0. 75% ( 10! 7 ! 1cm) , 0. 5g EB DNA , 0. 75% 100 ml TBE , BIORAD 2200 , 10V, 17h : 4 : DNA 2 5 1.6 DNA DNA , M crotec E6 DNA 2 10~ 50Gy DNAdsb 1( a) DNA DNAdsb , DNA ( ) 1( b) ; 1( c) dsb 2Gy dsb , 10Gy , dsb , Fig. 1a Changes of DNAdsb after 10~ 50 Gy Fig. 1bDensitometer tracing pattern of the band 2 irradiation ( electrophoretic pattern) . Band1~ 6 are in the Fig. 1a peak 1 correspends to the DNA samples by 50,40, 0, 20, remained in the sample w ells of gel, peak 2 10, 0 Gy irradiation respectively corresponds to the DNA migrated into the gel 2 0Gy 2h dsb , DNAdsb , DNA , DNA Fig. 1cThe rate of DNA remaind in the sample Fig.2a DNA dsb repair in two hours after 0 Gy wells and migrated into the gel by defferent dose irradiation. Bands