人外周血单个核细胞热原检测法的研究.pdfVIP

人外周血单个核细胞热原检测法的研究.pdf

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2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 时间,本文选择pH6.0为最佳的分离条件。 钠的浓度为2mmol·L一,同时又能减小流动相中的钠盐对等离子体的影响。 4.4 m 的,选择流动相中含0.2 mol·L~EDTA。 4.5微波萃取可溶性砷形态的测定采用的微波萃取,分别以1%盐酸、1%硝酸、2%醋酸、50%甲醇4种 溶剂作为萃取剂,测定了提取液中不同砷形态的含量,结果见表1(表略),标准溶液与不同萃取剂提取的仁 青芒觉中砷形态的色谱图分别见图4一A、B(图略)。实验结果显示,仁青芒觉中的砷主要以无机态As(Ⅲ) 取液中绝大部分是As(Ⅲ)和As(V)。 4.6标准曲线与检出限用超纯水将标准储备溶液逐级稀释,配制成浓度为0,2,10,20,50ng·mL。1的As 峰面积对浓度进行线性回归。结果表明,在0~50 分别为: Y=0.66×105X一0.95×105 Y=0.72×105X一0.45×105 n 相关系数均在0.999以上,检出限(3倍空白溶液的标准偏差对应的浓度)分别是0.39g·g‘1和0.72 ng·g~。 4.7回收率及精密度 精密称取藏药仁青芒觉样品0.1g共9份,加入1%盐酸作为萃取剂,分别精密加入混合标准溶液[5 min混合均匀,按“3”项下方法制备供试溶液, As(11I)和As(V)的标准溶液]0.5mL,涡旋1 mg-mL。1 92.8%(RSD=1.8%),85.3%(RSD=2.8%)。 精密吸取“4.6”项下制备的10 As(Ⅲ)、As(V)的混合标准溶液,连续进样8次,按前述色谱 ng·mL。1 明精密度良好。 5结论 件,对仁青芒觉中砷的具体形态进行了测定。结果显示,仁青芒觉中的砷大部分都以无机As(Ⅲ)和As(V)的 形式存在。仁青芒觉中砷元素形态的分析,为藏药中砷元素的形态和毒理学研究提供了依据。 参考文献(略) (本文发表于《药物分析杂志)2011,31(10):1884) 人外周血单个核细胞热原检测法的研究 贺庆,高华,谭德讲,张嫒,陈晨,刘倩,王军志 (中国食品药品检定研究院,北京100050) 摘要目的:针对现有热原检测法存在的问题,研究建立人外周血单个核细胞热/原,(PBMC)检测法。方法:新方法依据人体发 热机理设计,用人外周血单个核细胞模拟人体,将其分别与热原标准品(细菌内毒素)、受试品溶液进行孵育,通过酶联免疫吸 2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 immunosorbent 附试验(enzyme—linked h;②PBMc—IL一6法可检测多种热原[如革 映受试品的致热活性及热原污染情况。结果:①本方法孵育时间可选择17—24 acid,LTA)、真菌来源的酵母多 兰氏阴性菌来源的脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)、革兰氏阳性菌来源的脂磷壁酸(hpoteichoic EU‘mL~,IL 糖(zymosan)],其对上述热原的反应总体较家兔法灵敏;③PBMc—IL一6法对细菌内毒素最低检测限为0.0125 一6在rJ,s(o.0125。0.4 HINl流感疫苗、双黄莲注射液、氯化钠注射液、葡萄糖注射液、甘露醇注射液、氟康唑注射液、棕榈酸帕利哌酮注射液的热原 结论:PBMc—IL一6法具有对热原的检测谱宽、灵敏度高、应用范围广、可靠性强等特点,作为现有热原检测方法的补充该方 法应得到进一步应用。 关键词:热原检测法;细菌内毒素;细胞因子;白细胞介素6(IL一6);

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