雷公藤甲素致大鼠急性心肌损伤的初步探讨.pdfVIP

第五届全国雷公藤学术会议论文汇编，2008年9月，福建泰宁 基础 雷公藤甲素致大鼠急性心肌损伤的初步探讨 王 菡1，黄光照2，郑 娜2，刘 良2 (1．三亚市人民医院病理科．海南三亚5720002．华中科技大学同济医学院法医学系，湖北武汉43003) 摘要：目的雷公藤甲素是雷公藤的主要有效成分，也是其主要毒性成分。方法 本实验课题采用心 电图测定技术、心肌酶检测、透射电镜、免疫组化等方法，多角度、多层次探讨甲素对大鼠心脏的毒理病理损 肿，中、低剂量组心肌细胞肿胀、空泡变性明显，较重区域还出现溶解坏死和收缩带坏死。给药后各处理组的 肿胀，峭减少，糖原颗粒减少。中剂量组心肌纤维断裂。线粒体明显肿胀。伴空泡样形成，嵴的数目亦明显减 少；高剂量组肌小节亦有一定程度的断裂，肌原纤维模糊，残存线粒体结构消失。免疫组化显示对照组心肌 细胞的CTnT呈均匀的棕褐色阳性反应，未见明显缺失；低剂量组灶性心肌细胞胞质内棕褐色颗粒较淡，脱 失；中剂量组局部心肌细胞胞质棕褐色颗粒较淡，少数缺染；高剂量组心肌细胞棕褐色颗粒缺染区扩大。结 论1、甲素的急性毒性与急性心肌损伤密切相关，其心脏毒性十分明显。损伤程度呈剂量相关性；2、甲素造 成心肌细胞损伤的毒理机制可能与线粒体损伤、细胞膜破坏有关。 关键词：雷公藤甲素；急性毒性；心脏毒性；法医毒理学 雷公藤甲素是雷公藤的主要有效成分，也是其主要毒性成分。本实验课题采用心电图测定技术、心肌酶 检测、透射电镜、免疫组化等方法，多角度、多层次探讨甲素对大鼠心脏的毒理病理损害和毒性机制。 雷公藤甲素LD；。的测定和心功能学检测 l材料与方法 1．1 LD50测定 Dow and 预实验采用上下增减剂量法(Up 口服甲素的LD5。，值为1．125mg／kg，95％可信区间为(1～1．75)rag／kg。 1．2动物分组 提供。大鼠随机分为4组，每组15只。具体分组如下： 对照组(A组)：／,／=15，灌服等体积生理盐水； 小剂量组(B组)：行=15，用量0．6mg／kg(0．5LD”)； 中剂量组(C组)：行=15，用量1．2mg／kg(1．OLD50)； 大剂量组(D组)：刀=15，用量2，4mg／kg(2．OLD50)。 · 169· 第五届全国雷公藤学术会议论文汇编。2008年9月，福建泰宁 基础 1．3主要仪器和试剂 1．3．1主要仪器 (1)精密电子天平(MettleToledo，PB303一SDR／FACT，瑞士) (2)振荡器(QL一901Vortex，国产) (3)生理机能实验系统(BL一420E+，国产) (4)全自动生化分析仪(Aeroset，美国) (5)微量取液器(QYQ-20型、QYQ-200型，国产) (6)隔水式电热恒温培养箱(PYX—DHS．35X40，国产) (7)普通冰箱 1．3．2主要溶液配制 (1)甲素溶液 甲素购自福建省医学科研所，纯度99．9％。以少量丙二醇溶解，4℃冰箱保存，实验时以0。9％生理盐 水稀释到所需浓度。 (2)玻璃器皿清沽液 重铬酸钾209，溶于200ml蒸馏水中，徐徐加入浓硫酸20ml，边加边搅拌。 (3)麻醉注射液 称取戊巴比妥钠29，溶于生理盐水lOOml，振荡器混匀，配制成2％水溶液，4C冰箱保存。 1．4给药方法 大鼠适应性喂养3天，一次性灌服上述3个剂量的甲素溶液，给药体积为lml／1009体重(给药方式与临 床用药途径保持一致)。对照组灌服等体积蒸馏水。实验前禁食一夜，自由进水，给药后禁食4h。给药后短 死。 1．5一般情况观察 给药后密切注意各组动物的外观体征、行为活动、五官分泌物、瞳孔、呼吸等一般情况。 1．6心功能检测 1。6．1心电图测定 (文献报道甲素急性中毒心电改变多在给药后16h出现汹3)。测量方法：连续测量5个心动周期，取其平均值， 纸速：25mm／s，定标电压