虹鳟链球菌病的病原学研究.pdfVIP

0 一孔 第4卷第2期 鲑 鳟 渔 业 December，1991 1991年12Jj SALM0N FISHERY Vo1．4 No．2 虹鳟链球菌病的病原学研究 S ．4z 牛鲁祺 t 叠 。zz I ● ● ● ● _ _ ●一 (黑龙江水产研究所) (哈尔滨市水产研究所) 摘要 本文记述了虹鳟链球菌病病原的分离，分类 以及生理和生化特征。从养殖虹鳟的肝 脂肪变性鱼的肝和肾分离到几个菌株特征一致 。用RB8605株进行了人工感染，100 虹鳟 死亡 证明了它是虹鳟致病菌，该菌为G 球菌，非溶血性，4O 胆汁培养基上能生长， 水解七叶林和马尿酸，血清学与兰氏D群血清相同，根据上述特征，该菌被鉴定为粪链球 菌 (SfrFpf0∞cc“s，aecatis)。 主曩诃 链堡堕童，藿垦兰， ．瘟幅，噬 ， 链球菌病是当前东北地区虹鳟养成阶段中死亡率较高的常见病、多发病，对养鳟业 影响很大，使从业者深 以为忧。国外，对于淡水鱼链球菌病的研究已有很多报道：1957 年保科首先在 日本静冈县养殖的虹鳟鱼发现链球菌引起的第一次病倒，其病原菌从生物 化学角度米衡量接近粪链球菌(Streptococcusfaecits)，Robinson和Meyer(1966)报 道在美国温水性淡水鱼金体美鳊也发生此病，检出病原被分类为非溶血性B群的一种链 球菌 (St．Sp nonhemol：dicGroupB) 自从Kusuda等 (1978) 由日本鳗鲡分离出 溶血链球菌以来，Kittao等 (1981)，大西 ·城 (1981)又从养殖的香鱼、虹鳟、罗 非色 以及天鱼 (琵琶鳟的幼鱼或陆封种)陆续分离出该茹并被确诊 为卢溶血链球菌感染 症。国内，仅见到海水网箱养殖银鲑的弧菌与链球菌并发症侧 报 道 (杜佳垠1962)。 1986年 以来，作者对养鳟者最头痛的所谓 “营养性肝病”在东北地区进行了流行病学调 查。通过病理学检查和病原学诊断，发现虹鳟鱼 “肝病”病例多系非溶血性D群粪链球 菌 ( rF 0c0cc“sfaecalis)感染所致。粪链球菌 (Stre．faeeatiS)是肠 道链球菌 类的一个菌群，与食物中毒有若，属人类致病菌。术文参照医学微生物鉴定更新技术， 对病原菌的特性进行了研究，现报告如下。 I 材料与方法 1．I 试验鱼取自黑龙江水产研究所渤海冷水鱼试验站和黑龙江省宁安县 旺·鳟鱼场。在 临诊中，取病鱼的肾或肝以剖面作涂片，革兰氏染色后镜检，如有大量 G 单个或成双 的球菌，即可初步判定为链球菌。 1．2 用于分离病原菌的T—H培养基，其成份为牛心 (或牛肉)浸 出液 1O00ml，蛋 白胨20g、氯化钠2g、碳酸氢钠2g、磷酸氢=钠 0．5g，葡萄糖2g、pH7．8。取严重病 — —研瓦工 孺墨 尔滨市卫生防疰站张润主任医师的大力协肚．谨致谢意， ： 2期 牛鲁祺等：虹鳟链球菌墒的病原学研究 27 鱼的肾或肝组织少许，直接涂布 (或划线)于5％羊血 T—H琼脂平板，室温培养，一 般在2—3天后即可长出明显一致的小菌落 如不纯可重复以上步骤在平板培养基上划 线纯化，最后接种于斜面培养基上密封保存，以便做生理生化和血清鉴定用。 札3 细菌的鉴定按常规法。 1．4 人工感染用注射法，取病鱼的肾脏，在灭菌研钵中加生理盐水1：10，研制成乳剂或 从血琼脂斜面培养基上的菌落制成生理盐水菌液 (用0．85 无菌生理盐水，稀释成与M CFarland氏混浊比色管第三管相当的浓度) 取E述生理盐水乳剂菌液接种担的背