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采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化PCR产物的观察.pdf
894 JOURNAL OF GUANGXI M DICAL UNIV RSITY 2003 Dec; 20( 6)
PCR
1 2 3 1 1 1
(530021)
:PCR : 31 , 45 PCR
DNA ,PCR 2 , 1 , ; 1
, DNA 2 PCR, 2PCR ,: 4
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DNA PCR
PCR ; ;DNA
Q51
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DNA DNA 1.2.3PCR : PCR 10 Ll, 95 2 min,94 30
DNA , s, 5458 30 s, 71 30 s, 3035 , PCR
DNA DNA 4 31 ,17 PCR
DNA PCR
, , 1.2.4: PCR 2
PCR DNA Ll SSCP: ¹ ( 400 ml) : 0. 025
2 PCR ,2 PCR , mmol Tris 1.211 4 g, 0. 088mmol 2. 642gº12%
, 3 ml»:
,,
1 , , 1h¼ ,
1. 1: 1995 1 1 2002 10 30 4 , , ,
45 4 Ll 1 Ll ,9398
DNA PCR , 3 min, ½ , ,
( SSCP) DNA DNA 924 ,300 V, 500 ml,36 h¾ ,10%
PCR ; 1 PCR 10 min, 2 , 3 min,
, ¿ 20 37%30 ,
SSCP , SSCP ( ml Ll
15 minÀ 20 ml Na CO (30 g/ L) + Na S O (2 g/
DNA ) , 2 PCR 2 3 2 2 3
DNA L ) 20 Ll+ 37% 30 Ll, , Á
1.2 10%35 min
1.2. 1 DNA : ¹ 15 g , 1.2.5Tip
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, ½ ¼ ¾ , 2. 5
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