玉米胚性愈伤组织的诱导及其植株再生的研究.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)9(3):11-131987 玉米胚性愈伤组织的诱导及其植株再生的研究 谢友菊 戴景瑞 郝 混 北（ 京 农 业 大 学） 近年来，利用体细胞无性系变异进行作物 将授粉后十多天的1-2mm幼胚取出，接种在 改良，已引起各国生物学家的极大关注。所谓 含有 1mgZ12,4-D的12多高糖 MS培养基 体细胞无性系变异就是指在组织培养过程中获 上，每系测定60-80个幼胚，暗培养在27℃恒 得的再生植株具有与其亲本植株不同特征特性 温条件下。约两周后，按特定的标准 见（结果部 的现象。这种未经过特殊选择压力的筛选而形 分）观察和统计胚性愈伤组织发生情况，用产生 成的遗传变异可能是一种随机突变，其机理仍 胚性愈伤组织的胚数和接种胚数计算诱导频率 不十分清楚。尽管如此，目前已利用这种方法 （务）。1-2周后复查，以最高百分比为准，衡 得到了优良的水稻品系、抗晚疫病的马铃薯品 量各系产生胚性愈伤组织的能力大小。 系和抗眼斑病的甘蔗品系等[1I，在玉米上也得 胚性愈伤组织需每两周转移一次，当胚性 到了抗除草剂的变异体，而且证明这些特性是 愈伤组织上产生了胚状体并发芽，继而胚芽鞘 稳定遗传的[91［O 伸长到1-2cm时，将单个胚状体转移到含有 鉴于上述原因，用玉米不同器官作外植体 2外蔗糖的1/2MS培养基上，置27-300C16 进行组织培养的研究显得格外重要，建立有效 小时光照 约（为2000勒克司）8小时黑暗的条 的组织培养系统，从中获得大量再生植株是上 件下培养，最终形成绿色而又根系发达的小植 述工作的首要前提。 株。以小植株数和具有胚性愈伤组织的幼胚数 1975年 Green和 Phillips首次报道从玉 计算各系的植株再生频率 （0o。我们的方法与 米未成熟胚培养出愈伤组织，并成功地获得了 Lu法的区别是，采用2多蔗糖的1/2MS培养基 再生植株61〔。此后，用玉米其他部位作外植体也 直接再生植株，省去他的最后一种培养基，从而 取得了同样的成功[10,1,12,3]；在另外的一些报道 简化了再生植株的步骤。当植株长到14-24cm 中，已获得可以长期保存的胚性愈伤组织[1［3,4,111 高时，移到土和虾石为 1:1的花盆中，注意掌握 1983年 Lu等用高糖的 ms培养基对若干杂 合适的湿度，成活后移到田里，生长直至成熟。 交种开放授粉的幼胚进行了培养，在所用的材 电镜扫描图象用日本 HitachiS-450扫描 料中都无例外地获得了高频率的胚性愈伤组 电子显微镜拍摄，电镜样品的制备按常规方法 织，并再生了植株18［1。本文的目的在于探讨 Lu 进行。 的“高糖法”，在控制授粉情况下，对自交系胚性 愈伤组织诱导及植株再生的效果。 结 果 和 讨 论 一些系的幼胚在接种后 10天左右即长出 材 料 和 方 法 白色、不透明、结构致密的胚性愈伤组织。最初 按一定要求选择29个国内外玉米自交系， 1985年春播种在北京郊区。所用的授粉方式 XieYoujuetal.:StudiesonInduction ofEmbrynic inMaizeandRegenerationofitsPlantlet 为控制授粉，即自交与姐妹交。在无菌条件下， 本文于 1986年1月24日收到。 11 ． 出现在盾片胚根鞘一端的边缘，形如摺皱，以后 逐渐扩大 （图1，图2)0这种胚性愈伤组织生长 缓慢。在接种后的30-45天内，一些系的胚性