温度pH和金属离子对仿剌参蛋白酶活力影响的研究.pdfVIP

维普资讯 温度、pH和金属离子对仿剌参蛋白酶活力影响的研究 王吉桥 ，唐 黎 一，许 重 ，程骏驰 ，王年斌2 (1．大连水产学院 生命科学与技术学院，辽宁 大连 l16023；2．辽宁省海洋水产科学研究院，辽宁省应用海 洋生物技术开放性实验室，辽宁 大连 116023；3．贵州大学 动物科学学院，贵州 贵阳 550025) 摘要：利用分光光度计比色法测定了温度、pH值和Hg2等9种金属离子对体长24．2cm+0．7 cm仿刺参(Apostichopus，D，2c淞)消化道中蛋白酶活性的影响。结果表明，蛋白酶的最适温 度为40℃，对热不稳定，最适pH为7．2。Hg2，Mn ，Ag，Pb ，Ba2，Ca2对蛋白酶的 活性有抑制作用，抑制作用由强至弱依次为Hg AgMn2pb2Ca2Ba2，其中Hg2 和A 与对照差异极显著(尸O．O1)，表现出极强的抑制作用；Cu ，Zn ，Mg则对酶活有 一 定的促进作用，其促进作用大小依次为 Mg Zn Cu ，Mg 与对照差异显著(尸 0．05)。 关键词：仿刺参 (Apostichopusjaponicus)；蛋白酶；温度；pH值；金属离子 中图分类号：Q48：Q55 文献标识码：A 文章编号：1000-3096(2007)11-0014-05 大规模养殖仿剌参急需开发出科学合理的人工 剂均为国产AR试剂；采用72l型光栅分光光度计、 饲料。了解仿刺参的营养需求和消化酶的动力学是配 美国 Beckman公司的大容量高速冷冻离心机和数字 制人工饲料的理论基础。国内外有关水产动物消化酶 控温式水浴锅。 的研究很多，对水产无脊椎动物消化酶的研究也取得 1．2方法 了一定的进展 【卜，但对于仿剌参消化生理方面的研 正常饲养的仿刺参停食 72h，尽量使其排空消化 究尚未见报道。为此，作者在实验室研究了温度、pH 道内的食物残渣，称体质量，测体长，于冰盘内注射 值和Hg 等 9种金属离子对体长 24．2cm±07cm仿 0．35mol／LKC1溶液，诱导排脏，获得消化道，剔除 刺参消化道中蛋白酶活性的影响，以探讨仿刺参的消 与消化道末端相连的呼吸树，用冰冻重蒸水配置的 化生理，为科学配制仿刺参人工饲料提供基础理论依 pH值 7．0磷酸盐缓冲溶液 (Na2HPO4-KH2PO4)冲洗， 据 。 在称量瓶中摇匀后称质量，置于冰箱中暂存备用。 1材料与方法 酶液的制取：在冰浴中用玻璃研磨器匀浆样品，每 l g样品研磨 1O～15rain，按 1．0g样品 10．0mL缓冲溶 1．1材料 液的比例分次加入pH值 7．o0的磷酸缓冲溶液。然后 实验用仿剌参共 16个，体长24．2cm±O．7cm(麻 在高速冷冻离心机中将匀浆液以4℃冷冻离心 3O 醉状态下)，体质量 179．866g士1．609g，取 自大连市黑 石礁海区，为 自然生长的个体。饲养在大连水产学院 收稿 日期：2005．04．26：修回日期：2005—09．20 海水养殖综合实验室，饲养用水为沙滤海水，每天 基金项 目：辽宁省 自然科学基金项 目 4／5换水量，盐度为 3O～32，水温为 12．0～16．0~C，投 作者简介：王吉桥 (1950一)，男，辽宁大连人，博士，教授，研 喂鼠尾藻粉和海泥，常规管理。