提高体细胞克隆猪成功率的尝试.pdfVIP

维普资讯 提 高体细胞 克 隆猪 成 功率 的尝试 田雨晨 译 自《日本养猪学会志))2004年 9月第41卷第 3号 185～192 张德福 审 前 言 利用显微注射法成功获得体细胞克隆猪 自从 Wilmut等 (1997)利用体细胞在世界上首 在体细胞克隆的成功制作方面的核移植方法 ， 次成功获得克隆绵羊 以来 ，至今牛 、小 鼠、山羊 、猫 、 是指去除第二减数分裂 中期 的未受精 卵的染色体 兔 、骡 、马 、老鼠、鹿的体细胞克隆也相继获得了成功 (去核)后 ，再 向该去核卵细胞质中导人经同期化至 克隆。在猪体细胞克隆方面 ，自岩元正树研究小组 、 G1／GO细胞周期 的体细胞核的方法。然后 ，为促进 PPL公司、Infigen公司成功 以来 ，其它众多研究小 分裂 ，用电刺激模拟受精方法进行活性化处理。 组也获得了成功 。将体细胞克隆技术应用于畜产领 细胞核导人法分 电流融合法和显微注射法二种 域 ，就能够大量繁殖具有优 良遗传性能的家畜 ，提高 方法。电流融合法是对未受精的卵细胞在去除染色 家畜的品种改 良效率；在养猪业 ，借助体细胞克隆技 体后 ，用电流刺激 ，使体细核与细胞质融合 ·导人 的 方法。克隆绵羊、克隆牛就是利用此方法进行细胞 术除了能够利用优 良种 畜增加产量外 ，从遗传资源 核的导人 ，并成功地获得 了体细胞克隆动物。电流 保护的角度 出发，还能使猪群疾病得到净化 ，近交退 刺激后 ，一般再次用 电流刺激或者药物处理即可激 化得以阻止 。除了畜产业 以外 ，体细胞克隆技术也 活细胞 ，但要成功克隆牛仅采用上述处理方法还不 可望用于野生动物 的保护 、结合基因重组技术使生 能激活细胞 ，需与蛋 白质合成抑制剂联合使用才有 物活性物质通过家畜进行工厂化生产 、移植用器官 效 。另一方面，由于小鼠卵细胞易激活，利用 电流融 生产等方面；尤其是由于猪内脏器官的大小、解剖 合法进行细胞核导人 的同时也激活 了卵细胞。由 学和血液生化学特征与人类 的器官非常接近，因 Wakayama发 明的显微注入法是利用 Pizo一 显微 此 ，有望逐步实现异种动物问内脏器官移植 、再生 操作仪将体细胞核直接导人去核卵细胞的方法。该 医疗 、人类疾病动物模型等方面的应用。据报道， 方法是导人体细胞核时不激 活卵细胞 的活性。因 以前在异种动物器官移植时 ，有 目的地去除引起人 此 ，体细胞核受到未受精卵细胞质 内卵细胞促成熟 体器官移植急性排异反应 的主要异种抗原 伍一乳糖 因子 (MPF)的影 响，引起染色体凝聚 (PPC)。已经 甙酶后 ，使 一1，3一半乳糖转移酶遭到破坏后成 证实染色体凝聚在成功进行体细胞克隆方面具有重 功克隆出了猪 (2002)。像这种利用猪体细胞克隆 要作用。 技术的研究正在世界各国广泛地开展着 ，但仍然存