5-氮杂胞苷对RASSF1去甲基化与胃癌细胞增殖和凋亡的关系.pdfVIP

浙江临床医学2014年1O月第16卷第1O期 ·1537 · · 基 xdtx3I-究 · 5撼 胞苷对RASSF1去甲基化与胃癌细胞增殖和凋亡的关系 李信华 张万里 曾荣 杜寒松 翟荣林 牛彦锋★ -- 【摘要 】 目的 探讨5．氮杂胞苷对RASSF1基因去甲基化与胃癌细胞增殖和凋亡的关系。方法 将SGC7901胃癌细胞分为 AZA组 (5-氮杂胞苷处理)和CON组 (未用5．氮杂胞苷处理)，比较两组细胞RASSF1基因启动子甲基化 、基因表达、细胞周 期和凋亡的差异。结果 CON组SGC7901胃癌细胞RASSF1基因启动子MSP处于甲基化状态 ，AZA组 胃癌细胞未检测到甲基 化，AZA组RASSF1基因mRNA和蛋白质表达水平高于CON组细胞。AZA组SGC7901胃癌细胞G0／G1期和凋亡率高于CON组细 胞 (P0．05)，s期、G2／M期和PI低于CON组细胞 (P0．05)。结论 5．氮杂胞苷可逆转胃癌细胞RASSF1基因启动子甲基化 状态 ，使沉默的RASSF1基因重新获得表达而抑制 胃癌细胞的增殖并促进其凋亡。 【关键词】 胃癌 5．氮杂胞苷 RASSF1 甲基化 细胞增殖 凋亡 【Abstract】 objective Tostudytheeffectsof5-azacytidine’SdemethylationforRASSF1geneongastriccancercell’S proliferationandapoptosis．Methods SGC7901gastriccancercellsweredividedintoCONgroup (without5-azacytidinetreatment) andAZAgroup (with5-azacytidinetreatment)．ThedifferencesofRASSF1genepromoter’Smethylationstatus，mRNAandprotein expressions，cellcycleandapoptosiswerecompared．Results TheRASSF1genewasmethylatedinCON groupwithinhibited mRNA andproteinexpressionswhiletheywerereversedinAZA group．TheSphase、G2／M phasena dPIinAZA groupwerelower thaninCONgroup，whiletheG0／G1phasena dapoptosisrateswerehigher．Conclusion 5-azacytidinecouldreverseRASSF1gene promoter’Smethylationandsilentgeneexpressions，whichinhibitsgastriccancercell’Sproliferationandpromoteapoptosis 【KeyWords】 Gastriccnacer 5-azacytidineRASSF1Methylation Cellproliferation Apoptosis 胃癌的发病机制与基因表达异常有关，引起基因 WesternBlot试剂盒购于武汉天根生物公司。 表达异常的机制包括基因突变和遗传学改变，其中遗 1．2 5一氮杂胞苷药物处理 SGC7901胃癌细胞分为 传学改变是最主要的发病机制 [1，2]。RAS相关区域家 CON组 (仅完全培养基培养，未用 5一氮杂胞苷处理) 族 1(RASassociationdomainfamily1，RASSF1)通过 和AZA组 (在完全培养基培养的基础上行 5一氮杂胞 抑制 eyclinD1发挥调控细胞周期的作用，在胃癌中可 苷处理 )，5一氮杂胞苷 (终浓度为 50 mol／L)孵育 检测到高甲基化灭活状态，与 胃癌的发病机制、病情 12h后PBS清洗 3次，更换新鲜培养基培养。 及预后密切相关 。本研究 自2010年