Notch1基因沉默对滋养细胞增殖与凋亡的影响.pdfVIP

罗青清等 Notchl基因沉默对滋养细胞增殖 与凋亡的影 响 第 5期 Notchl基因沉默对滋养细胞增殖与凋亡的影响① ·实验与基础研究 · 罗青清 刘晓夏 郑艳芳 赵茵 邹丽② 华中科技大学附属协和医院妇产科 (湖北 武汉) 430000 中国图书分类号 R714 文献标识码 B 文章编号 1001-4411(2015)05-0755-03；doi：10．7620／zgfybj．j．issn．1001—44l1．2o15．o5．39 摘【 要l 目的：探讨Notehl基因沉默后对滋养细胞增殖与凋亡生物学功能的影响。方法：构建Notehl蛋 白基因干扰质 粒，体外培养人早孕期胎盘绒毛膜外滋养细胞系 HTR一8／SVneo细胞进行转染。应用实时荧光PCR计数检测转染后Notch1mR— NA相对表达水平 ，CCK一8检测细胞转染后活性情况 ，Westernblotting检测Bcl一2凋亡蛋白家族表达情况。结果 ：同未转染组 相比，空白质粒转染组与基因沉默组mRNA相对表达水平分别为0．97±0．03、0．31．4-0．10，基因沉默组 mRNA表达与其它两组 差异有统计学意义 (P0．05)。Notehl基因沉默组同空白质粒转染组相比细胞活性明显下降 (P0．05)，同时Notch1基因沉默 组抗凋亡蛋白Bcl一2表达较空白质粒转染组明显降低 (P0．05)，而促凋亡蛋白Bax表达明显增加 (P0．05)。结论：Notchl 基因可通过调节 Bcl一2凋亡蛋白家族参与滋养细胞增殖与凋亡过程，是胎盘形成发展过程中的正向调节因子。 【关键词】 Notchl基因 滋养细胞 细胞增殖 细胞凋亡 胎盘形成 EffectofNotchlgenesilenceonproliferationandapoptosisoftrophoblastcells LUOQing—Qn，LIUXiao—Xia，ZHENGYah—Fang，eta1．DepartmentofObstetricsandGynecology，XieheHospital AffiliatedtoHuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430000，Hubei，China [Abstract] Objeetive：ToexploretheeffectofNotchlgenesilenceonproliferationandapoptosisoftrophoblastcells．Methods： Notehlinterferenceplasmidwasconstructed，humanplacentalextrachorionietrophoblastcelllineHTR 一8／SVneoduringthefirsttrimesterof pregnancywasculturedinvitrofortransfection．Real—timefluorescentPCR wasusedtodetecttherelativeexpressionlevelofNotch1mRNA aftertransfection，CCK一8assaywasusedtodetectcellviabilityaftertransfeetion，Westernblottingwasusedtodetecttheexpression of Bcl一2protein．Results：Comparedwiththecellswithouttransfection。hterelativeexpressionlevelsofNotch1mRNAwere0．97±0．03in blankplasmidtransfeetiongroupand0．31±0．10 ingenesilencegroup．Therewasstatisticallysignificantdifferencebetweengenesilence groupandtheothertwogroups(P0．05)．Cellviabilityingenesilencegroupwasstatisticallysignificantlylowerthanthatinblankplas— midtransfectiongroup(P0．05)，hteexpressionlevelofBcl一2proteiningenesilencegroupwasstatisticallysingificantlylower~thant