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实验设计专题研究系列之(二) 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 实验专项 1.实验原理 生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。 (2)脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ染液→红色 (3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色 2.要点提示 (1)实验材料的选择。 由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质,因此在实验的选材上应注意以下两点:①材料本身应无色,以免对结果产生干扰;②材料应富含相关物质,使现象更显著。 (2)斐林试剂与双缩脲试剂的比较。 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 0.1 g/mL NaOH溶液 0.05 g/mL CuSO4溶液 0.1 g/mL NaOH溶液 0.01 g/mL CuSO4溶液 鉴定物质 还原糖 蛋白质 添加顺序 甲、乙两液等量混匀后立即使用 先加入A液1 mL,摇匀,再加入B液4滴,摇匀 反应条件 50~65 ℃水浴加热 不需加热,摇匀即可 反应现象 样液变砖红色 样液变紫色 3.实验流程图示(见下图) 先根据选材预测实验结果,然后再用实验验证,因此本实验属验证性实验。 (1)还原糖的检测和观察: 结论:还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有还原糖。 注:溶液颜色的变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色。 (2)脂肪的检测和观察: 方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色 方法二: 方法二: (3)蛋白质的检测和观察: (4)淀粉的检测和观察: 【典例示范】 从细胞膜上提取了某种成分用非酶法处理后,加入双缩脲试剂出现紫色;若加入斐林或班氏试剂并加热,出现砖红色。该成分是( ) A.糖脂 B.磷脂 C.糖蛋白 D.脂蛋白 解析:本题考查细胞膜的主要化学成分以及重要化合物的鉴定。细胞膜的主要成分是磷脂、蛋白质和少量的糖类。蛋白质遇双缩脲试剂呈紫色;还原糖遇斐林或班氏试剂,在加热条件下出现砖红色。 答案:C 归纳总结:几种常见物质的鉴定 检测 试剂 颜色反应 备注 还原糖 斐林试剂 砖红色 水浴加热;甲液和乙液混合后加入 蛋白质 双缩脲试剂 紫色 A液、B液依次加入 淀粉 碘液 蓝色 — 脂肪 苏丹Ⅲ染液 橘黄色 — 苏丹Ⅳ染液 红色 — DNA 甲基绿 绿色 — 二苯胺 蓝色 沸水浴加热 检测 试剂 颜色反应 备注 RNA 吡罗红 红色 — 酒精 橙色的重铬酸钾溶液 灰绿色 酸性条件下 CO2 澄清石灰水 浑浊 — 溴麝香草酚蓝溶液 黄色 — 【实战演练】 斐林试剂与双缩脲试剂都是由甲液(NaOH)和乙液(CuSO4)组成的,下面是某同学研究斐林试剂与双缩脲试剂应用的探究实验,其中NaOH的质量浓度均为0.1 g/mL,CuSO4的质量浓度均为0.05 g/mL,实验结果如下表。请回答相关的问题: 试管 第1次加入物 第2次加入物 第3次加入物 处理 颜色变化 1 2 mL NaOH 2 mL CuSO4 2 mL苹果汁 加热 砖红色 2 2 mL NaOH 2 mL苹果汁 2 mL CuSO4 加热 砖红色 3 2 mL苹果汁 2 mL NaOH 2 mL CuSO4 加热 砖红色 4 2 mL CuSO4 2 mL苹果汁 2 mLNaOH 加热 砖红色 5 2 mL CuSO4 2 mL NaOH 2 mL苹果汁 加热 砖红色 6 2 mL苹果汁 2mL NaOH 4滴 CuSO4 加热 砖红色 7 2 mLNaOH 4滴 CuSO4 2 mL苹果汁 加热 砖红色 8 2 mL苹果汁 2mL NaOH+2mL CuSO4 2 mL HCl 加热 不变 (1)斐林试剂的配制方法是:将0.1 g/mL NaOH与 0.05 g/m LCuSO4 混合,随用随配。斐林试剂的常规使用方法是:在待测样液的试管中加入斐林试剂, 后,再把试管放入 ,观察试管中出现的颜色变化。 (2)设计1~5号试管的实验目的是:探究 。结论是 。 (3)设计6号试管的实验目的是:探究双缩脲试剂 。结论是 。 (4)8号试管与其他试管的反应结果比较说明: 。 解析:(1)考查斐林试剂的配制和使用方法,属于基础知识。(2)通过表格对比1~5号试管内的变化,发现斐林试剂甲液(NaOH)和乙液(CuSO4)加入试管的顺序不同,结果却一样。(3)通过表格看6号试管,发现是双缩脲试剂的使用方法,但结果却可以出现斐林试剂的检测效果,故双缩脲试剂可代替斐林试剂检测还原糖。(4)8号试管内的变化说明,酸性条件下斐林试剂不能进行显色反应。 答案:(1)等量 摇匀 50~60 ℃温水水浴中加热2 min (2)苹果汁、斐林试剂甲液(NaOH)和乙液(CuSO4)加入试管的顺序的变化是否影响实验结果 苹果汁
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