荚膜红假单胞菌类胡萝卜素的稳定性能初探.pdfVIP

荚膜红假单胞菌类胡萝卜素的稳定性能初探 黄贵闽 ( 福州大学生物科学与工程学院 ) hgm820830@ 摘要：从荚膜红假单胞菌细胞中提取类胡萝卜素，探讨光照、pH、金属离子、温度和氧化还 原剂等对色素稳定性的影响。结果表明，光、温度、酸碱、Fe+3 +2 、Cu 、H O 和 Na SO 对荚膜 2 2 2 3 红假单胞菌类胡萝卜素的稳定性均有较大影响，而金属离子 Na+ +2 + +2 、Ca 、K 、Zn 与抗坏血酸 对色素稳定性无影响。荚膜红假单胞菌类胡萝卜素在中性 pH 下、避光 4℃冷藏，其稳定性 较好。 关键词：荚膜红假单胞菌，类胡萝卜素，稳定性 目前，类胡萝卜素已被FAO 和 WHO 等国际组织认定为 A 类营养色素，并在许多国家和地区获准作为 营养、着色双重公用的食品添加剂，广泛用于保健品、医药及化妆品工业[1] 。类胡萝卜素的生产方法有化 学合成法、植物提取法和微生物发酵法，其中化学合成法用的最多。由于合成色素存在不同程度的毒性甚 至致癌的危险，因而开发生产天然类胡萝卜素资源具有重要意义。近年来，微生物发酵生产类胡萝卜素已 受到国内外学者的广泛关注，其中报道较多的是利用三孢布拉霉菌和红酵母等生产类胡萝卜素，光合细菌 中的沼泽红假单胞菌生产类胡萝卜素也有所报道。在色素稳定性方面，植物类胡萝卜素报道较多,而有关微 生物类胡萝卜素的报道相对较少。荚膜红假单胞菌是本实验室选育的光合细菌，它含有丰富的类胡萝卜素， 具有生长快、抗杂菌能力强等特点，是微生物发酵生产天然类胡萝卜素的良好资源。本文继前期对荚膜红 假单胞菌类胡萝卜素提取条件优化的基础上，探讨提取色素的稳定性能。该研究为荚膜红假单胞菌类胡萝 卜素的开发应用做基础工作。 1. 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌种与培养基 菌种：荚膜红假单胞菌为实验室选育菌种[2] 培养基：光合细菌培养基[2] 1.1.2 试剂 石油醚（沸程 90～120℃）、丙酮、甲醇、H O 、盐酸、氢氧化钠、抗坏血酸、三氯化铁、硫酸 2 2 铜、硫酸亚铁、硫酸锌、氯化钙、氯化钾、氯化铵等均为分析纯。 1.1.3 主要仪器 JY92－2D型超声波破碎仪 ；Sp-1105型可见分光光度计；TGL-16C型台式离心机等。 1.2 方法 1.2.1 类胡萝卜素的提取 [3] 。将 荚膜红假单胞菌接种后，在 30℃、500lux 光照条件下培养 52h （类胡萝卜素生成量达到高值） 菌液于 3500r/min 离心 25min ，收集离心后的沉淀细胞，采用 200W 功率超声波破碎 8min （破碎液为丙酮 和甲醇的混合液，丙酮甲醇比例 8：1）后，在9000r/min 下离心 9min，采用石油醚或丙酮萃取，得到类胡 萝卜素溶液备用。 1 1.2.2 荚膜红假单胞菌类胡萝卜素的稳定性能 将荚膜红假单胞菌类胡萝卜素（以下简称为色素）溶液分别置于不同光照、pH 、温度、金属离子、氧 化还原剂等条件中，定时取样测定色素含量变化，并计算色素损失率。 1.2.3 色素测定：采用分光光度计在波长482nm 下检测。 1.2.4 色素损失率计算