血清丙肝病毒RNA二种提取方法的比较.pdfVIP

( ) 59 江西医学院学报　1997; 37 1 : 59～ 62 A c ta　A cad em iae　M ed ic inae　J iang x i 血清丙肝病毒 RNA 二种提取方法的比较 王　伶　黄　超 　孔宪涛 　彭凯欣 (第二附属医院检验科　南昌　330006) 　　【提要】　24 例抗 阳性的血清标本, 同时以硫氰胍半字符热酚变性方法和蛋白酶 肖化法 H CV K I 裂解提取丙肝病毒 ( ) , 并应用反转录半字符多聚酶链反应( ) 和套式多聚酶链 RN A H CV RN A R T PCR 反应( ) 检测 。结果表明, 硫氰胍半字符热酚法明显优于蛋白酶 消化法。前者处 N e st PCR H CV RN A K 理标本的阳性检出率为 583% , 后者处理标本的阳性检出率为 333% (P 0 05) ; 前者操作步骤简 便, 在试剂的保存等方面优于后者, 故前者更适于临床 H CV RN A 的检测 　　　　关键词: 　肝炎, 病毒性, 非甲非乙型　　核糖核酸, 病毒　　血清诊断　　硫氰胍热酚法△ 蛋白酶 K 消化法△ 　　中图号: 　 512. 63; 　　 446. 61 R R ( ) 　　 目前, 国内实验室开始 的检 , 83 42 ℃ ; 250 H CV RN A mm o l L T r is H C l PH 测不多, 一则因为 裂解抽提时, 比较容 , 50 , 2 5 RN A mm o l L KC l mm o l L D T T mm o l 易降解, 操作较繁锁; 二则H CV 含量低, 需 L 亚精胺。 ) ( ) 提高敏感度和准确率。本文应用二种 2 　 聚合酶 5 : H CV R T aqDN A U L P ER K N A 裂解抽提的方法: 硫氰胍热酚法和蛋白 IN G ELM ER CE TU S 酶 消化法, 对抗 阳性血清进行处 　　10 × : K H CV bu ffer P ER K IN G ELM