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动物实验的设计和实施 动物实验设计概论 For scientific, ethical and economic reasons, it is important to design animal experiments well, to analyze the data correctly, and to use the minimum number of animals necessary to achieve the scientific objectives 动物实验设计概论 一般来说，动物实验的研究工作应该明确描述：： 研究的目的和/或者需要验证的假说。 选择特定动物模型的原因。 动物种、品系、来源和类型。 每个独立实验步骤的详细描述，包括研究设计和使用动物数量。 数据分析所用的统计学方法。 动物实验设计概论 动物实验设计的意义 一、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要 二、目前许多动物实验质量不高 1、动物质量不高,低级别动物给实验结果的科学性带来影响。 2、实验设计和统计学分析能力有限 三、一个好的实验设计，对统计学分析来说帮助很大，可以使问题变得更加容易解决 四、一个不正确的实验设计，导致结果信息无用。 动物实验设计概论 动物实验的分类 1、确证性的实验：用一种最大可能,正确解答问题的系统方法，收集有关处理实施后动物反应的科学数据。 2、探索性的实验：为产生新的假说提供素材。 这两类实验都涉及在实验人员的控制下，对动物施加一定的处理或操作，来发现是否处理在实验对象上引起一定的反应，或者对这种反应进行定量。 3、检验性实验：是观察性的实验，用于发现科研人员不能控制的变量之间的联系。这种联系可能是暂时的也可能是长期的。 动物实验设计概论 动物模型应用的重要步骤 一、动物实验通常是研究某种类、品系或性别动物的生物学特性，并间接推断人或其他研究对象的相关方面。 二、3个重要方面 1、基于对研究对象和模型（候选）动物中疾病发展方面掌握的已有知识 2、进行一个或多个实验，观察模型对所实施的处理如何反应 3、考察模型实验的结果与研究对象物种的相关性　 动物实验设计概论 3R原则 一、减少 NO.1 Reduction 二、替代 NO.2 Replacement 三、优化 NO.3 Refinement 差异的控制 进行动物试验设计时，需要考虑的一个重要控制因素就是实验中的非研究目的差异。 1、遗传引起表型差异(遗传学质量控制） 2、其他原因，例如：分组因素、饲养条件微小变化 3、在实验中引入了太多的‘背景噪音’ 差异的控制 一、概述 有机体的形态行为特征要适应环境，正是这种适应的不同导致有机体产生个体之间的差异，因而，动物的适应性的倾向对一个精确的实验设计来说是不可回避的挑战。 生物学的观察是在一个可变背景上进行的 1、生命形成的化学过程复杂 2、生命适应环境不停的变化，稳定性差（差异大，所用数量多） 差异的来源 1、实验者 2、动物固有 3、动物所处环境相互作用产生的差异 差异的控制 二、实验者带来的差异 1、实验过程的实施 实验操作的一致性、准确性、完整性： A: 每只动物更换注射器 B: 注射器容量，精确 C: 根据称重给药（吸入药品后注射器重量-空注射器重量=剂量） D: 良好的操作技术（避免给药时，药物溢漏） 实验操作的小心，减少动物紧张情绪： A: 代谢 B: 血流（影响血流速度，从而影响药物的吸收率） 差异的控制 二、实验者带来的差异 2、不准确的测量 A：尽管现在的测量手段越来越先进，但是有些方法本身就存在缺陷。 例如：凝胶电泳（点和带的迁移率、密度、大小受很多微妙因素影响）；光密度扫描（色彩的饱和度可以使结果呈现非线性） B: 观察动物自然行为的测量，控制更困难。 例如：采用多个不同观察人员，数据交换分析数据。 一个连续的时间点，重复观测。 差异的控制 二、实验者带来的差异 2、不准确的测量 C: 动机状态观察 专业观察人员，采用同一标准。行为类型被分解成更加数量化的组分。 动物不同行为分解为元素，采用同一打分系统。 D: 整体动物进行实验时，行为学和生态学观测的差异是可以控制的 GLP( good laboratory practice)，最根本的基础是实验中得到的数据和信息的可信性是通过人员的工作质量来保证和实现的。实验观察的每一个步骤，必须按照SOP（standard operating procedure)的文本执行。 差异的控制 三、固有动物之