几种miniprep提取质粒DNA方法的比较与改良.pdfVIP

·280· 文章编号：1007—6611(2009)03—0280—03 几种miniprep提取质粒DNA方法的比较与改良 牛蕾蕾， 张更谦， 杨思仪， 郭大玮 (山西医科大学法医学院物证教研室，太原030001) 摘要： 目的 比较并建立一种简单的、稳定的质粒DNA提取改良方法，探讨其在分子生物学实验研究中的应用价值。方 法采用琼脂糖凝胶电泳对质粒DNA提取的试剂盒法、煮沸法、碱裂解法、碱裂解结合酚氯仿法四种方法进行比较。结果 试剂盒法的电泳谱带亮度最高且无RNA条带，煮沸法、碱裂解法、碱裂解结合酚氯仿法的电泳谱带亮度依次增高。结论 试剂盒法制备DNA纯度最高，且操作简便省时。 关键词：质粒；PGEX-2T；碱裂解法；琼脂糖凝胶电泳 中图分类号：Q503 文献标识码：A DNA A and on extraction comparativeimprovedstudyplasmid NIU Medwd Lei—lei，ZHANG Si—yi，GUODa-wei(DeptofBioto#calEvidence，SchoolofForensicMed如ine，Shanxi Geng-qian，YANG University，Taiyuan030001，China) To a and methodforextractionof DNAanditsvalueinmolecularbio- Abstract： exploresimple，improvedsteady Objective plasmid research．MethodsFourroutineDNAextractionsof were gel Results logieal plasmidcomparedbyusingagamseelectrophoresis． Theband Mini Kitwnsthe withoutRNAband．The ofthebands Plasmid increased using，11ANpmp brigIltest brightness usingboilingly— sis methodcombinedwith extractionmetllodinturns．Conclusion method，alkalinemethod，alkaline lysis lysis phenol-cMomform Ly- sis PlasmidKitis andconvenientfor a of DNA． Mini by髓ANprep simple producinghighpurityptasmid Key lysismethod；agarosegeleleetrophoresis words：plasmid；PGEX-2T；alkaline 明胶海绵或止血纱布压迫止血，本组有2例为静脉窦 大，切除肿瘤用小刮圈，动作要轻柔。 出血，其中1例术后视力恶化，复查头颅CT示瘤腔出 总之对于经蝶切除垂体腺瘤的严重并发症大出 血，又行瘤腔血肿清除术，因此在压迫止血时要准确， 血要引起足够重视，术前充分判断，术中正确处理， 不要在瘤腔填塞过多材料，以免损伤视神经。③肿瘤 随着经验积累和手技的提高，并发