miR-204通过下调Bcl-2和Sirt1表达抑制肝癌细胞生长.pdfVIP

168 细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)2015，31(2 · 论著 · 文章编号：1007—8738(2015)02—0168—05 miR一204通过下调 Bcl2·和 Sirtl表达抑制肝癌细胞生长 李 扩 ，许秋然 ，刘 欣 ，刘青光 ，王茂德 (西安交通大学医学院第一附属医院：神经外科，肝胆外科，陕西 西安 710061) [摘 要] 目的 探讨微小RNA200(miR-204)在肝细胞癌中的表达、临床意义及可能分子机制。方法 收集手术切除的60例 肝细胞癌及对应癌旁肝组织 ，实时定量 PCR(qRT—PCR)检测 miR-204在肝癌及癌旁组织中的表达，免疫组织化学染色检测 miR-204下游潜在靶点Bcl-2与组蛋白脱乙酰酶 1(Sirt1)的表达；用人工合成的miR-204模拟物转染人 SMMC-7721肝癌细胞， MTr法及流式细胞术检测SMMC-7721细胞的增殖、凋亡的情况 ，qRT—PCR、Westernblot法分别检测 Bcl一2与Sirtl的mRNA和 蛋 白表达。结果 miR-204在肝癌组织中表达水平显著低于对应癌旁组织；肝癌组织中miR204低表达与肿瘤大小、肿瘤个数、 肿瘤TNM分期显著相关；miR-200低表达组 Bc1．2与Sirtl蛋白表达显著高于miR-200 高表达组，相关性分析结果显示肝癌组织 中miR-204与Bcl-2、Sirtl蛋白表达呈显著负相关；miR-204可显著抑制SMMC-7721细胞的增殖并促进其凋亡，并下调 Bcl-2与 Sirtl的mRNA与蛋白表达水平。结论 miR-204在肝癌组织中表达下调并与肝癌恶性临床病理特征有关，miR-204抑制肝癌细 胞增殖 、促进其凋亡的作用可能与下调 Bcl-2和Sirtl表达有关。 [关键词]miR-204；肝细胞癌；凋亡增殖；Bcl-2；Sirtl [中图分类号]R735．7，R392—33，Q279 [文献标志码】A Growth inhibition of human hepatocellular carcinoma by miRNA-204 v／a down·regulationofBcl-2andSirtlexpression LIKuo，XYUQiuran，LIUXin，LIUQingguang ，WANGMaode DepartmentofNeurosurgery，DepartmentofHepatobiliarySurgery，FirstAffiliatedHospital，MedicalCollege Xi’anJiaotongUniversity， ， Xi’an710061，China lAbstractJ Objective ToinvestigatetheleveIofmicroRNA-204 (miR一200)inhumanhepatocellularcarcinoma(HCC) and itseffectonthepotentialmechanism oftumorgenesis．M ethods Real-timequantitativePCRfqRT．PCR)wasappliedto detecttheexpressionofmiR-200 inHCC (n=60)andthecorrespondingtumor．adjacentnormaltissues．Theexpressionsof Bcl-2andSirtlweremeasuredbyimmunohjstochemist (1HC)．TheartificiaImiR．204wastransientlytransfectedintohuman SMMC-7721cells ／nvitro．TheproliferationandapoptosisofthecellsweredetectedbyM丌 assayandflow cytometry