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NMF308nmfnmf小鼠耳蜗毛细胞凋亡方式及z-VAD-FMK对毛细胞的保护作用.pdf

50 JournalofAudiologyandSpeechPathology2015.Vol23.No.1 实验研究 NMF3O8 厂/ 小 鼠耳蜗毛细胞凋亡方式及 z—VAD—FMK对毛细胞 的保护作用△ 李胜利 王玉虎 张敏燕。 李 白芽。 郑庆印。 朱雯瑾 朱宏亮。 【摘要】 目的 了解年龄相关性听力损失小 鼠耳蜗毛细胞 的凋亡方式,探讨半胱氨酸蛋 白酶 (caspase)抑制剂 z—vAD—FMK[z—Val—Ala—Asp(Ome)一fluoromethylketone]防治老年 性聋 的效果 。方法 选用新生 NMF308~I 小鼠14只和成年同窝NMF308~ 小鼠32只,分为新生小鼠腹腔注射组(14只)、成年小鼠腹腔注 射组(14只)和成年小 鼠圆窗膜注射组 (18只),各组又分为治疗组 (注射 z—VAD~FMK)和对照组[注射二 甲基亚枫 (dimethylsulfoxide,DMSO)],采用圆窗膜局部和腹腔注射两种方法给药,给药前后行 ABR检测,用免疫荧光染色化学 技术 TUNEL、caspase--3和 PI(碘化丙啶)染色标记耳蜗毛细胞 ,观察各组耳蜗毛细胞 的凋亡和存活状况 。结果 NMF308~s 小 鼠从 1月龄开始发生听力减退和毛细胞功能改变 ,到 2月龄时 ,caspase--3激活表达的毛细胞凋亡现 象是毛细胞凋亡出现的最早表现 ;TUNEL阳性标记特征稍晚出现;PI标记可见毛细胞细胞核固缩和碎片出现的时 间从 2月龄开始 ;到 3月龄时该种小鼠听力基本丧失,耳蜗毛细胞严重缺失;而应用 z—VAD—FMK治疗后,各治疗 组小 鼠ABR反应阈明显好于对照组 ;耳蜗毛细胞凋亡数 目较对照组减少 ,存活数 明显较对照组多,尤 以圆窗膜注射 组 明显 。结论 NMF308~I 小鼠耳蜗毛细胞的死亡方式 以caspase--3凋亡途径为主,应用 caspase--3抑制剂 z— VAD—FMK定 向内耳给药,可以阻断 caspase--3信号途径激活所导致的毛细胞凋亡 ,从而有效防治老年性聋 。 【关键词】 老年性聋 ; 外毛细胞 ; 凋亡 ; 抗凋亡抑制剂 ; 动物模型 DOI:10.3969/j.issn.1006—7299.2015.01.013 网络出版时间 :2014—12~31 11:28 网络 出版地址 :http://www.cnki.net/kcms/detail/42.1391.R1128.008.html 【中图分类号】 R764.43’。6 【文献标识码】 A 【文章编号】 1006—7299(2015)01—0050—07 RolesofOaspaseInhibitorsinCochlearHairCellsSurvivalandPreventingAge— RelatedHearingLoss LiShengli,WangYuhu,ZhangMinyan,LiBaiya,ZhengQingyin,ZhuWenjin,ZhuHongliang ( ScientificResearchOentre,theSecondAffiliatedHospital,Medicine SchoolofXianJiaotongUniversity,Xian,710004,China) [Abstract] Objective Inthisstudy,weinvestigatedtheapoptosisofhaircellinthecochleaofage—related hearingloss(AHL)generatedbyENU mutagenesis,andtostudyapancaspaseinhibitor(z—VAD— FMK)whichis tOprotectthecochleahaircellsfrom hearinglossinducedbyage— relatedhearingloss(AHL).Methods Throughz — VAD—FMK i

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