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直肠癌第三站淋巴结微转移的检测和临床意义.pdf

·33· ·临床论著· 直肠癌第三站淋巴结微转移的 检测和临床意义 郭小卫张立陈建霖章辉 【摘要】目的探讨直肠癌肠系膜下动脉根部淋巴结(即第i站淋巴结)微转移的检测方法,评 价第三站淋巴结转移与直肠癌患者临床病理特征关系。方法选择95例第三站淋巴结阴性患者, 使用连续多层切片HE染色法和细胞角蛋白20(CK20)免疫组织化学染色法检测第三站淋巴结微转 移状态。分析第三站淋巴结微转移与直肠癌患者临床病理特征关系。结果95例患者中共送检 2ll枚第三站淋巴结,使用连续多层切片HE染色法发现10例16枚淋巴结发生微转移,另有4例6 枚淋巴结CK20表达阳性,联合检测在第三站淋巴结微转移检出率为10.4%(22/211),第三站淋巴结 阴性患者微转移的阳性率为14.7%(14/95);多因素相关检验显示第三站淋巴结微转移与肿瘤位置、 组织学分型、分化程度及浸润深度密切相关。结论使用连续多层切片HE染色法和CK20免疫组 织化学染色法联合检测第=姑淋巴结微转移是可行的;肿瘤位置、组织学分型、分化程度、浸润深度 可作为预测第三站淋巴结微转移临床病理指标。 【关键词】直肠肿瘤;肠系膜下动脉;CK20;转移 肠系膜下动脉根部淋巴结(即第三站淋巴结),在直肠癌 2.方法:第三站淋巴结取材制备:直肠癌肠管及系膜切 淋巴引流途径中是重要一站;第三站淋巴结发生转移,意味 除遵循全直肠系膜切除术(TME)原则。在直视下锐性解剖, 着直肠癌已扩散,最后防线已不复存在,远处转移已经发生 完整切除包裹在盆腔脏器筋膜内的直肠及系膜,切除5cm 或即将发生,并将直接关系到患者的预后。2005年7月至肿瘤远端肠管及直肠系膜。对低位肿瘤保证切缘位于原发灶 2008年7月我们使用连续多层切片HE染色法及细胞角蛋远端3cm以下,术中在左结肠动脉水平结扎切断肠系膜下 白20(CK20)免疫组织化学染色法联合检测95例(211枚)动脉,单独清扫第三站淋巴结,使该部位血管骨骼化。淋巴结 患者第三站淋巴结的微转移状态,探讨第三站淋巴结微转移 标本经甲醛固定,石蜡包埋,进行连续多层切片,每个蜡块间 相关的临床病理因素。 隔40斗m厚度,切取3个层面。每个层面间隔4“m。厚度连 续切2次,共3个层面6张切片。每个层面2张切片先做常 资料与方法 规HE染色,应用德国Leila公司LeieaQ诵n计算机图像分析 1.临床资料:本组为手术治疗的95例直肠癌患者,所有 系统,采用双盲阅片参照阳性和阴性对照。对于阴性者,再行 患者均行第三站淋巴结清扫,并且常规病理检测为阴性。男 CK20免疫组织化学染色镜检。免疫组织化学一抗为鼠抗人 CK20单克隆抗体。免疫组织化学试剂盒及一抗均购白北京 50例,女45例,年龄32。82岁,中位年龄60岁。原发肿瘤位 中杉金桥公司。应用标准s.D染色,DAB显色,苏木精染色封 于腹膜返折以上35例,位于腹膜返折以下60例,行Dixon 片。抗体稀释浓度为1:50,阴性对照以PBS代替一抗。 术61例,行Mile术34例,肿瘤浸润深度采用TNM分期,pT。 3.微转移阳性判断标准llI:(1)用图像分析系统测量淋巴 3例,指侵及黏膜及黏膜下层;pT223例,指侵及肌层;pT346 例,指侵及浆膜层及浆膜外;pT423例,指侵及邻近脏器。所 结内癌巢,0.2mill癌巢2.0mm并且得到常规HE染色的 有病例术前均未行放化疗。 证实者,诊断为微转移。(2)癌巢≤0.2mm但CK20免疫组织

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