抗原肽免疫磁珠检测BLV抗体的研究.pdfVIP

2014年 10月 食品研究与开发 第 35卷第2O期 FoodResearchAndDevelo 检测分析 —===104 DOI：1o,,3969／j．issn．1005-6521,．2014．20．．027 抗原肽免疫磁珠检测BLV抗体的研究 赵卫东 。付俊淑 ，黄金海：-。郑文杰 ，陈磊 ，刘伟-，王玉玲- (1．天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，300061；2．天津大学化工学院，天津300072) 摘 要：建立抗原肽偶联磁珠进行BLV抗体的检测技术，探讨肽偶联磁珠的条件及效力。对牛白血病病毒gp51和p24 蛋白的抗原表位进行预测分析，合成3条抗原肽，把合成肽与表面带一-COOH功能团的磁珠进行偶联，形成固定化，反应 原性 良好的免疫磁珠，用于BLV抗体的检测。确定了肽与磁珠最佳偶联条件，3种免疫磁珠均有反应原性。gp51蛋 白上 的253-266：SSFNITQGWHHPSQ线性序列具有最佳的检测结果。利用免疫微球对 191份样品进行检测，结果与国外牛 白血病检测试剂盒进行对比，检测符合率为92．6％。gp51蛋白上存在BLV的优势B细胞线性表位；抗原肽免疫磁珠可 以用于检测BLV抗体，这为进一步研制液体磁流芯片了奠定基础。 关键词：牛白血病病毒；抗原表位；合成肽；免疫磁珠 DevelopmentofaBLV AntibodyDetectionMethod byAntigenPeptide-Linked Imm~ omagneticBeads ZHAOWei—dong，FUJun—shu：，HUANGJinhal：’，ZHENGWen-jie， CHENLei，LIUWei，WANGYu-ling (1．AnimalPlant＆FoodstuffsInspectionCenterofTianjinEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau， Tianjin300461，China；2．CollegeofChemicalEngineeringandTechnology，TianjinUniversity，Tianjin， 300072，China) Abstract：ToestablishthemethodofantigenpeptideimmunomagneticbeadsforhtedetectionofBLVantibody．3 antigenpeptideswerepredictedbytheanalysisofgp51andp24proteinandsynthesized，thenthesynthetic peptideswerecoupledwiththemagneticbeadswith-COOHontheirsurfacetoofrm immunomagneticbeadsforthe detectionofBLVantibodies．Theoptimumcouplingconditionsforpeptideandmagneticbeadswasdetermined，also htereactogenicityof3antigenpepfideimmunomagneticbeadswasverified，．thelinearBcellepitope253-266： SSFNTYQGWHHPSQwasfilteredingp51protein．Comparedwihthteforeignbovineleukemiatestkitsof191 samples。thecomplianceratereached92．6％．ItSfeasibilitythattheantigenpeptideimmunomagneticbeadswas usedtodetecthteBLVantibodywhichasthebasisoftheresearchofthefluxofliq