过量表达琥珀酸输出蛋白SucE对谷氨酸棒杆菌厌氧生产琥珀酸的影响.pdfVIP

2015年 3月 化 学 工 业 与 工 程 第 32卷 第 2期 Mar．20l5 CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING V0I．32 No．2 ‘串 夺‘ 夺‘ ÷‘ 夺‘ ’争 ’夺 ’夺 。夺 夺‘ ‘ ． ‘ 生物化工过程 ； doi：10．13353／j．issn．1004．9533．2015．02．013 ． 夺 ．幸 ．争 ．争 ．争 ．争 ．幸 ．÷ ．々 ．争 过量表达琥珀酸输出蛋 白SucE对谷氨酸棒杆菌厌氧 生产琥珀酸的影响 夏慧华 ，尹国民 ，朱年青 ，陈 涛 (1．天津大学化工学院，教育部系统生物工程重点实验室，天津 300072；2．烟 台只楚药业有限公司，山东 烟 台264002) 摘要 ：谷氨酸棒杆菌 CorynebacteriumglutamicumATCC13032在厌氧条件下通过三羧酸循环还原臂 合成琥珀酸。高效地将细胞 内的琥珀酸输 出到胞外，对琥珀酸的生物合 成具有重要 意义。本 实验 以C．glutamicumXZ为出发菌株过表达琥珀酸输出蛋白表达基 因sucE。突变株 C．glutamicumXZ (pExhsucE)的琥珀酸得率提高了7％，生产率提高 了19％。通量分析表 明，过表达 sucE基 因后 乙 醛酸循环的相对通量提高了50％。采用两阶段培养 ，突变株 C．glutamicumXZ(pExhsucE)的琥珀 酸产量达到 518mmol·L～，厌氧阶段 的比生产率为0．95mmolgCDW～ ·h～，1molglucose的平均 得率为 1．5otol。 关键词 ：琥珀酸输出蛋 白；代谢通量分析 ；两阶段发酵 ；谷氨酸棒杆菌 中图分类号：Q819 文献标志码 ：A 文章编号 ：1004—9533(2015)02—0074—06 EffectofoVerexpressi0nofSuccinateExporterSucE onAnaerobic SuccinateProduction byCorynebacterium glutamicum XiaHuihua ，YinGuomin ，ZhuNianqing ，ChenTao (1．SchoolofChemicalEngineeringandTechnology，TianjinUniversity，Tianjin300072，China 2．YantaiZhiehupharmaceuticalCo．，Ltd，Yantai264002，China) Abstract：Corynebacterium glutamicum ATCC 13032producessuccinatethroughthereductivetricarboxyl- icacidcycleunderanaerobicconditions．Efficientexportofsuccinateintotheculturesupernatantisim · portantto increase itsproduction．In thisstudy，sucE geneoverexpressionwasintroduced into strain C． glutamicum XZ．TheresultingstrainC．glutamicumXZ(pExhsucE)showeda7％ increaseinsuccinate yieldanda 19％ increase insuccinateproductivity．Also，therelativefluxoftheglyoxylatepathway in- creasedby50％ ．Usingtwo-stagecult