大肠杆菌和酵母表达系统的研究进展.pdfVIP

生物技 术进展 2014年 第4卷 第6期 389～393 CurrentBiotechnology ISSN 2095—2341 大肠杆菌和酵母表达系统的研究进展 张云鹏， 温 彤， 姜 伟 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 ，北京 100193 摘 要：20世纪70年代以来，分子生物学及基因组学迅猛发展，其在生物及医学领域发挥着越来越重要的作用。在发 酵工业中，分子生物学技术广泛应用于菌种的遗传改造和基因工程菌株的构建，以期提高发酵产物的产量并丰富发酵产 物的类型。其中，利用原核及真核表达系统进行外源基因的扩增、表达 以生产蛋白疫苗、核酸疫苗和酶制剂等是近十年 来发酵工业的新兴领域。本文从表达载体和宿主菌改造两方面综述近些年来大肠杆菌及酵母表达系统的新进展与新 技术。 关键词：大肠杆菌表达系统；酵母表达系统；表达载体；宿主菌改造 DOI：10．3969／j．issn．2095-2341．2014．06．02 TheResearch ProgressofEscherichia coliExpression Systemsand Yeast ExpressionSystems ZHANG Yun—peng，WENTong，JIANGWei StateKeyLaboratoriyforAgro—biotechnology，CollegeofBiologicalSciences，ChinaAgriculturalUniversity，Beijing100193，China Abstract：Sincethe70sof20th century，therapid developmentofmolecularbiologyandgenomicshaveplayed increasingly importantroleinthefieldofbiologicalandmedicalscience．Infermentationindustry，molecularbioloyg techniquesarewidely usedinconstructionofgeneticallyengineeredbacteriaandstrainsimprovement，inordertoimprovetheyieldoffemr entation productsandenrichfermentationproducttypes．Inthepastdecade，theuseofprokaryoticandeukaryoticexpressionsystemsfor exogenousgeneamplificationnadexpressiontoproduceproteinsvaccines，DNA vaccinesandenzymicpreparations，etc．isthe emergingfieldoffemr entationindustry．Inthispaper，wereviewedtherecentprogressonE．coliexpressionsystemsandyeast expressionsystemsfrom twoaspectsofvectorsandhosttrnasformation． Keywords：Escherichiacoliexpressionsystem ；Yeastexpressionsystem；expressionvectors；hostbacteriatransformation 在发酵工业中，菌种无疑是影响产物产量和 领域之一。本文从表达载体和宿主菌改造两方面 质量最重要的因素之一。早期研究中通常通过定 综述 了大肠杆菌和酵母工程菌株构建与改造的新 向筛选 自然突变的方法得到发酵菌种 ，此种方法 进展与新技术。 耗时长、效率低。随后出现的物理／化学诱变技术 提高了菌种筛选的速度，提高了筛选及生产效率。 1 大肠杆菌表达系统研究进展 从 2O世纪 70年代起，随着分子生物学及基因组 学的快速发展，各种工程菌株遗传操作体系的完 1．1 大肠杆菌表达载体的构建与评价 善，已能十分方便地利用微生物进行多种蛋 白质 以大肠杆菌为代表的原核生物 由于易于培 疫苗、核酸疫苗和酶制剂等的发酵生产。利用原 养、生长速度快等优势成为原核工程菌的代表菌 核及