大豆饲料产品中主要抗营养因子含量的检测与分析.pdfVIP

动物营养学报 2015，27(1)：221—229 ChineseJournalofAnimalNutrition doi：10．3969／j．issn．1006-267x．2015．01．027 大豆饲料产 品中主要抗营养因子 含量 的检测与分析 周天骄 谯仕彦 马 曦 贺平丽 (中国农业大学动物科技学院，动物营养学国家重点实验室，北京 100193) 摘 要：本试验 旨在应用间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)法以及 色谱法测定不同加工工 艺的大豆饲料产品中主要大豆抗营养因子大豆球蛋 白、B一伴大豆球蛋 白和胰蛋 白酶抑制因子以 及大豆 中蔗糖 、棉子糖和水苏糖 的含量。采用ELISA试剂盒对 国内257份大豆制品中大豆球蛋 白、B一伴大豆球蛋 白和胰蛋白酶抑制因子含量进行检测与分析 ；利用离子 色谱建立 了大豆产品 中蔗糖、棉子糖和水苏糖的灵敏、准确的同步测定法，并对国内92份大豆制品中寡糖含量进行 检测与分析。结果表明：发酵豆粕、膨化大豆、大豆浓缩蛋 白和大豆分离蛋 白中大豆球蛋 白、B一 伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量相对较低 ；本试验所建立的离子色谱同步测定大豆中蔗 糖、棉子糖和水苏糖的方法具有灵敏度和准确性高、重现性好的优点，适用于大豆寡糖的测定； 通过对实际样品的检测和分析，发现发酵豆粕和大豆分离蛋 白中3种大豆寡糖含量均相对较 低。本试验所得到不同加工工艺的大豆产品中主要抗营养因子含量的相关数据将为大豆在畜 禽饲料 中的高效利用提供很好的技术支撑 。 关键词：ELISA；离子色谱；抗营养因子；大豆产品 中图分类号 ：$816．17 文献标识码 ：A 文章编号 ：1006267X(2015)01—022109 大豆因其富含蛋 白质且氨基酸平衡而成为人 确测定大豆中的各种抗营养因子水平已成为了大 类和动物优质的植物蛋 白质源 。随着畜禽养殖业 豆制品质量评定以及大豆制品加工工艺监控等工 和饲料业的快速发展，豆粕作为主要植物性蛋 白 作中必须解决的问题 。 质原料 ，其需求量逐年递增。然而，豆粕中含有多 大豆 中胰蛋 白酶抑制因子与脲酶有相似的含 种抗营养因子，如蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白、 量和活性，可通过检测脲酶活性间接反映胰蛋 白 B一伴大豆球蛋 白以及寡糖等，这在一定程度上限 酶抑制因子活性 j，但该法灵敏度低且对于过度 制了其在饲料 中的应用，尤其是幼畜饲料。近几 加热豆粕测定准确度很低 ，此外还有酶化学检测 十年来 ，科研工作者致力于研究通过不同的加工 法、免疫化学测定法等，其 中酶化学法灵敏度低且 工艺来消除或降低大豆中的抗营养因子，如通过 对加热过度 的豆粕测定结果变异较大，而通过酶 加热法钝化蛋 白酶抑制因子、微生物发酵 以及膨 联免疫吸附测定 (ELISA)法直接测定胰蛋 白酶抑 化法降低大豆蛋 白致敏性等，以期大豆及大豆制 制因子的灵敏度 、准确性和重复性均较好 ]。大 品能够在食品和饲料领域得到更广泛的应用。但 豆球蛋 白、p一伴大豆球蛋 白的检测方法包括 电泳 由于技术水平、工艺参数等的不同，造成大豆产品 法、色谱法、质谱法、液质联用、免疫化学法、实时 质量 良莠不齐，之前由于检测技术的限制 ，很难直 PCR(real—timePCR)以及 多 重 PCR (multiplex． 观准确地评价其钝化消除效果，因此如何快速准 PCR) 等，其中电泳法多用于定性和半定量，不 收稿 日期：2014-08-13 基金项 目：国家 自然科学基金青年项 目 作者简介：周天骄 (1989一)，男，河南三门峡人，博士研究生 ，从事动物营养与饲料安全研究。E-mail：ztj—cau0116@outlook．com 通信作者：贺平丽 ，研究