机能学实验标本的制备与疾病动物模型.pdfVIP

机能学实验标本的制备与疾病动物模型 1。蟾蜍坐骨神经—腓肠肌标本制备 （1）如何制备蟾蜍坐骨神经—腓肠肌标本？其主要操作步骤什么？ ①破坏脑和脊髓：用左手食指、中指夹住蟾蜍的两个前肢，无名指和小指夹住两后肢， 拇指按住头，右手持探针沿蟾蜍头顶中央向后滑动，当触及凹陷处时 （即枕骨大孔），将探 针垂直刺入枕骨大孔，到达脊椎椎管，改变探针方向， 向上刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织。 将探针退至进针处，再向尾侧方向刺入脊椎椎管，反复提插探针捣毁脊髓。待其四肢松软、 呼吸停止，表示脊髓和脑已被完全破坏，否则应按上述方法反复进行；②剪除躯干上部和内 脏：用一只手捏住蟾蜍的骶髂关节，另一只手持粗剪刀在骶髂关节水平以上 0.5—1cm 处剪 断脊柱，用组织镊夹住脊柱断端，提起蟾蜍使其头部自然下垂，用粗剪刀沿脊柱两侧剪除头 胸部和内脏，保留后肢、骶骨、脊柱及其由它发出的坐骨神经；③剥皮：左手持组织镊夹住 脊柱断端，注意镊子不要夹在神经上，右手捏住脊柱背部皮肤的边缘，逐步向下牵拉剥离皮 肤。剥至大腿时，如果阻力较大，可先剥下一侧大腿的皮肤，再不另一侧。皮肤全部剥离后， 将标本置于盛有任氏液的培养皿中。洗净双手及用过的全部手术器械；④分离两腿：用粗剪 刀从背侧剪去骶骨， 然后沿脊柱的中线剪开脊柱， 再经耻骨联合中央剪开， 将蛙腿分成两半， 并将分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中 （在剪开脊柱和耻骨联合时不要伤及坐骨神经并 保持神经的完整）；⑤游离坐骨神经：取一侧下肢标本，用蛙钉将蛙腿背位固定于干净的腊 盘上（固定三点：脊柱、膝关节、脚掌）。用玻璃分针沿脊柱侧游离腹腔部坐骨神经，再循 骨二头肌和瓣膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分， 直至胫腓神经分 叉处。取一段缝合线，穿过脊柱根部的坐骨神经，将其结扎并用眼科剪剪断。手执结扎线将 神经轻轻提起，顺序向下剪断所有神经分支，将神经搭在腓肠肌上，加滴任氏液。用粗剪刀 剪断骨二头肌、瓣膜肌、骨四头肌肌腱，自膝关节周围剪除并刮净所有大腿肌肉，在距膝关 节 1cm 剪断股骨；⑥完成坐骨神经—腓肠肌标本：用玻璃分针穿透腓肠肌跟腱，逐步游离腓 肠肌至膝关节处，在腓肠肌跟腱处穿线结扎，提起结扎线，在其下方剪断跟腱。用粗剪刀水 平方向伸进腓肠肌和小腿之间，在膝关节处剪断小腿，使其分离。拿掉固定于膝关节处的蛙 钉，将制备好的坐骨神经—腓肠肌标本放入盛有新鲜任氏液的培养皿中待用。 （2）如何验证蟾蜍坐骨神经—腓肠肌标本的兴奋性： 验证神经肌肉标本兴奋性常用的方法有两种：①锌铜弓刺激。将锌铜弓在任氏液中浸湿 后触及坐骨神经，如果腓肠肌发生一次明显而迅速的收缩，则表示标本的兴奋性性良好。② 用刺激器给与神经一次中等强度的电刺激，如引起肌肉一次明显的收缩，则表示标本的兴奋 性性良好。 （3）制备坐骨神经—腓肠肌标本时应注意哪些问题？ ①破坏脑和脊髓前，可先用纱布夹捏蛙头部两侧的耳后腺以排出蟾酥，避免其溅入眼内；如 果溅入眼内，应立即用清水冲洗；②破坏脑和脊髓要完全，待其四肢松软、呼吸停止，表示 脊髓和脑已被完全破坏，否则应按上述方法反复进行；③皮肤和内脏全部剥离后，须洗净双 手及用过的全部手术器械。 切勿用自来水冲洗标本； 用剪刀沿正中线平分脊柱和耻骨联合时， 要保证神经的完整，不要伤及神经；④分离标本时，只能用玻璃分针，不可用金属器械分离 或用手触摸标本。以免其对神经和肌肉的损伤；⑤分离神经干和其分支时，动作须轻柔，避 免过度牵拉和其它不良刺激；⑥股骨的保留长度应为 1cm 左右，便于固定标本；⑦制作标本 过程中，为防止标本干燥，须滴加任氏液，使其保持湿润；⑧标本制成后，用锌铜弓或中等 强度电流单个刺激标本，验证标本的兴奋性是否良好；⑨标本制成后，应立即将其置于新鲜 任氏液中，待其兴奋性稳定后方可进行实验。 2．蟾蜍坐骨神经—缝匠肌标本制备 （1）制备坐骨神经—缝匠肌标本制备的方法是什么？ 一侧蟾蜍腰背下肢标本的方法同坐骨神经—腓肠肌标本制备 1-4项相同。取一侧下肢， 用蛙钉背位固定在蛙板上，在分离前要先辨认缝匠肌。缝匠肌起自耻骨的外侧，止于胫骨上 端，是一条狭长而肌纤维平行的薄片状骨骼肌。确认缝匠肌后，用玻璃分针分别分离并剪去 缝匠肌的内、外侧肌膜。坐骨神经分支由缝匠肌的中部内侧进入肌肉，分离肌膜时要仔细， 先由上而下分离外侧，再分离内侧。从内侧分离到肌肉下 1/3 近中线处时，可以看见一条较 细的神经进入肌肉时分成两条细小分支。 沿此细小神经向中枢端分离，在大收肌和大内直肌 的下方伴随着血管向上走行，于股骨头处汇入坐骨神经，用眼科剪由上而下剪断神经干周围 的分支及附着在神经表面的结缔组织，直至进入缝匠肌部位。用玻璃分针在缝匠肌下方肌腱 出轻轻挑起，并穿线结扎，剪断缝匠肌与耻骨端和胫骨端的联系，将神经与